Сбой матрицы: Сбой матрицы public group | Facebook

Сбой матрицы: Сбой матрицы public group | Facebook

Содержание

23 забавных сбоя в матрице или где-то я уже это видел

Если вы смотрели первую часть культовой трилогии «Матрица», а вы её конечно же смотрели, то вы должны знать что такое сбой в матрице. Обычно мы называем это чувство дежавю, когда вас не покидает чувство, что вы точно уже где-то это видели. Судя по фильму, от дежавю не стоит ждать ничего хорошего, поэтому смотрите эту классную подборку, но не теряйте бдительности, потому что прямо сейчас за вами могут наблюдать агенты Смиты.

 

Машина, а за ней ещё полмашины?

 

Может агенты Смиты сегодня выглядят так?

 

Редкий двойной сбой

 

Был уверен, что открыл банку, но поторопился с выводами. Банка в банке!

 

Если это не сбой в матрице, то я не знаю как это ещё можно объяснить

 

Сбой в тройном количестве

 

Дополнительная кошка от матрицы

 

Две одинаковые женщины..

 

.. и ещё две..

 

.. и ещё три!

 

Необъяснимый и пугающий глюк от Google Maps

 

Смотрюсь в тебя, как в зеркало..

 

Марти бы сошел с ума

 

100%-ый сбой

 

Как и здесь

 

Идентичная пара в одном и том же ресторане, но видимо здесь глюк в матрице произошел и у самой матрицы, и пара поменялась полами

 

Определённо сбой

 

Где-то я уже это видел

 

Снова сбой матрицы коснулся общественного транспорта

 

Настоящее матричное сумасшествие

 

И вот наконец реальные герои оригинального сбоя в матрице

 

Помните?

Думаете это зацикленная гифка? Нет, просто у вас бесконечное дежавю

Поделиться в соц. сетях

Вечерний@Калининград: сбой матрицы, покушение на пляж и скрепы Достоевского

В русском языке вскоре должны официально закрепиться уже привычные всем неологизмы, такие как «дилер», «киллер», «риелтор» (а не «риэлтор», как некоторым казалось), «лоукостер», «лэптоп» и даже родное нашему уху «карате». Слова эти в русском языке появились довольно давно и обосновались в нем прочно, а некоторые даже успели слегка устареть. Ну кто теперь говорит «лэптоп», в самом деле? Однако правилами их написание никак не регламентировалось, что неудивительно — в последний раз они обновлялись в 1956 году, когда никаких каршерингов с лоукостерами еще не было. По крайней мере, в Советском Союзе. Теперь Минпросвещения решило закрепить в языке неологизмы, а также новые конструкции, такие как мини (мини-турнир), миди (миди-платье), видео (видеотехника), аудио (аудиотехника), медиа (медиахолдинг). Еще лет 50 у россиян похоже уйдет на то, чтобы запомнить утвержденное написание. И к другим, чуть менее прорывным новостям вторника.



Эпидемия коронавируса в регионе не унимается. Если показатели заболеваемости и вышли на какое-то «плато», то закрепилось оно где-то в районе 400 человек в сутки. К сожалению, эти цифры, как и показатели смертности (даже в официальным виде довольно внушительные), уже никого особенно не пугают. На входах в ТЦ антипрививочники толкаются с охранниками, в автобусах пассажиры обзывают кондукторов, блюдущих масочный режим, разными нехорошими словами. В Минздраве осторожно говорят о «замедлении роста числа заболевших». То есть сам рост продолжается, но уже не такими оглушительными темпами. В общем, хороших новостей у нас для вас тут пока нет.



Региональные (и не только) власти пытаются справиться с ковидной ситуацией в своей очаровательной и слегка извращенной манере: создать видимость усилия, получить неожиданный результат и резко прокрутить фарш обратно. Денег на полноценный локдаун ни у страны, ни у населения нет. Вернее, у страны, может, и есть, но тратить их как-то не хочется, поэтому принимаемые меры носят в основном какой-то косметический характер. Корреспондент «Нового Калининграда» Оксана Ошевская рассуждает о том, почему действия властей так непредсказуемы и нелогичны, как это отражается на антиковидной кампании, и даже предлагает выход из ситуации.



Променад в Пионерском собираются расширить. Причем радикально, с 3 метров аж до 20. Как следует из документации, должна увеличиться именно ширина пешеходной зоны, также планируется велодорожка и «место для передвижения технологического транспорта». На деле 1,3 -километровый участок променада вероятно будет ждать судьба светлогорского собрата — то есть застройка элитным жильем (они же апарт-отели), кафе и ресторанами. Видимо, план построить променады с отелями «практически по всему побережью» приведен в силу, имеет потенциальных инвесторов, и его уже мало что остановит. Даже то, что между старым променадом и морем помещался еще и довольно приличный пляж, которому в 20-метровом варианте конструкции места явно не останется. Последняя надежда — президентская резиденция, вблизи которой и развернется вся эта «реконструкция». Пусть сам верховный главнокомандующий там был от силы один раз. Но, возможно, пляж спасет божественное вмешательство: говорят, в роскошный комплекс у моря часто наведывается патриарх.



Внезапно выяснилось, что идея установить в центре Калининграда памятник Федору Достоевскому принадлежит не самому очевидному автору — руководителю группы компаний «Содружество» Александру Шендерюку-Жидкову. Об этом рассказал замглавы горадминистрации Игорь Шлыков. Откуда у Шендерюка-Жидкова столько пробивной мощи, чтобы стереть с карты города сквер имени Адама Мицкевича, не устрашившись международного скандала, и устроить там сквер и фан-зону Федора Достоевского, можно только догадываться. Есть подозрения, что настоящим инициатором все же был кто-то, кто обладает административным ресурсом. Например, уровня главы региона. Заодно власти попытались как-то объяснить, почему обязательно надо было выселять из сквера одного классика и заселять в него другого. «И почему драмтеатр? Ну, наверное, потому что его [по произведениям Достоевского] постановки уже там порядка семидесяти лет происходят. Кроме этого, сама улица Достоевского такая небольшая и расположена в частном квартале — в квартале низкоэтажной застройки. А место, которое у нас находится на пересечении улиц Грекова-Носова — вот этот сквер наиболее центровой. И 200 лет Федору Михайловичу — мне кажется, это та достойная дата, которая должна быть на виду. Ну и плюс это получается такая большая культурная скрепа — это хорошее место в том числе и для экскурсионных и туристических маршрутов. Для того, чтобы и школьники, посещая драмтеатр, приходили к этому памятнику тоже», — сказал Шлыков. Понятнее от его слов конечно не стало. Лишь чуток скрепоноснее.

Сбой матрицы — Есть мнение

Во времена позднего Горбачева по СССР ходил анекдот про дохнущих от голода кур. Кормить их было нечем, поэтому в курятнике рисовали геометрические фигуры: надо же было хоть что-то делать! Антиковидные меры часто напоминают нечто похожее.

Некоторые предпринимаются явно как наименьшее из зол для власти. Например, не нужно быть эпидемиологом, чтобы увидеть: в условиях тотального пренебрежения средствами защиты набитые людьми автобусы и маршрутки стали главным рассадником заразы. Но ограничить число пассажиров в силу понятных причин (удар по экономике и массовое недовольство) не получается: денег на полноценный локдаун ни у страны, ни у населения нет. Поэтому «козлами отпущения» становятся детские кружки и фудкорты: ну надо же хоть что-то делать!

А когда дело все-таки доходит до транспорта, ситуация вновь приобретает любимые извращенные формы. На время последних «нерабочих дней» число автобусов и электричек в приморском направлении в Калининградской области решили резко сократить. Но пассажиропоток никто не изучил, и в первый же день вдруг выяснилось, что ими пользуются те, кто едет работать из Калининграда на прибрежные стройки. Корректив добавила солнечная погода (ее учесть тоже не догадались), и вечером в Светлогорске-Зеленоградске случился коллапс. Все это — на фоне рекордов заболеваемости. Как итог — через несколько часов нововведения решили отменить. Правда, к тому времени, как прежнее расписание вернулось, хорошая погода успела смениться ненастьем.

Но раж естествоиспытателей не иссяк, и после «недолокдауна» история повторилась, достигнув наконец стадии фарса. На этот раз объектом эксперимента стали МФЦ. Именно через них население пытается решить проблемы с порталом госуслуг, на который должны приходить QR-коды для привитых и переболевших. Сбоев, видимо, даже не сотни, а тысячи, и огромные очереди последних недель — тому доказательство. Что решают в ответ областные власти? Правильно, оставляют возможность посещать МФЦ только тем, у кого QR-код уже есть. Как итог — за считанные часы губернаторский Instagram едва не треснул от возмущенных комментариев, и эти нововведения отменили тоже.

Здесь стоит вспомнить ситуацию с военнослужащими, для которых в принципе забыли сделать исключение, когда вводили режим QR-кодов (военные этой системой на госуслугах не учитываются и кодов не получают). Все это — в регионе, где базируется Балтийский флот. Постановление областного правительства изменяли неделю, а военных кормили уверениями, что их должны пускать в COVID-free зоны по справке просто так. Пускали далеко не всегда: а на основании чего это делать, комментария пресс-службы областного правительства?

Наконец, после «нерабочих дней» экзерсисы с «геометрическими фигурами» вышли на федеральный уровень. Утром в понедельник жители России проснулись и неожиданно узнали, что часть сертификатов о прививках «обнулилась». Это коснулось в том числе тех, кто вакцинировался более полугода назад, то есть до 8 мая. Соответственно, такие люди лишались QR-кодов. В принципе, грядущее сокращение срока действия сертификатов (сейчас это год) уже анонсировалось — но никто не ожидал и не предупреждал, что это случится настолько внезапно. Произошедшее очень быстро объяснили сбоем портала госуслуг — хотя вопрос, как могли случайно измениться сроки в миллионах отдельных файлов, которые относятся к учетным записям конкретных людей, так и остался без ответа. Из чего, видимо, стоит сделать правильный вывод и вовремя ревакцинироваться.

Все это: сбои матрицы, половинчатые меры и хроническая неспособность предугадать последствия, — создает ощущение нелогичности и хаоса. И, как следствие, усиливает недоверие к властям — стоит ли удивляться провалу добровольной вакцинации? Но не нужно забывать о том, что, в отличие от кур из анекдота, мы имеем возможность повлиять на ситуацию. Например, в сентябре 2022 года, в день губернаторских выборов. Да-да, несмотря ни на что. Принимающим решения об этом тоже забывать бы не следовало.

Оксана Ошевская

Cбой в матрице — глюки, невероятные совпадения и случаи

Содержание:

Сбои в матрице или глюки мозга: проверь себя

Сбои матрицы на экране: легендарные фразы больше не легендарные?

Сбои, глюки в «текстурах» матрицы или аномалии?

Восстание клонов или невероятные совпадения в вашем городе

Совпадения и сбои матрицы — вы были правы?

В матрицу можно верить или не верить, но жить в ней приходится. Пересматривая легендарное кино про Нео, Тринити, агентов Смит, мультфильм про мишек «Бернштейн», вольно-невольно задумываешься о сбоях матрицы, ищешь глюки в реальной жизни, волнуешься, объясняешь себе невероятные совпадения и случаи. Давайте вообразим, что действительно помещены в колбы с жидкостью, а наши тела подключены трубками… Добро пожаловать, в аттракцион невероятных совпадений, моментов, глюков, сбоев матрицы 2020! Что не так с этим миром? Апдейт, перезагрузка, пристегнитесь!

Можешь ли ты доверять миру, в котором живешь?

Сбои в матрице или глюки мозга: проверь себя

В 2003 году шведский философ Ник Бостром выдвинул гипотезу, что мы живем в симуляции. Гипотеза о матрице — очередная загадка Вселенной, а сбои, глюки, невероятные совпадения выносят нас за рамки действительности, перемещают в искусственную реальность.

Подмена реальности возможна!

Невероятные совпадения, дежавю, сбои, глюки матрицы хотя бы однажды случаются. Хотите, докажем? Ответьте на 10 странных, но простых вопросов, из которых в пяти случаях — вы будете сомневаться, в пяти других — уверенно отвечать, но правильно ли…

  1. Какого цвета штаны у Карлсона?
  2. С какой стороны Австралии находится Новая Зеландия?
  3. Был ли у старухи Шапокляк зонтик?
  4. В кадре из кинофильма «Кавказская пленница», какого цвета на Шурике смирительная рубашка?
  5. Представьте хоть одну загадочную статую на о. Пасха в шляпе? Получилось?
  6. Сколько океанов на планете?
  7. Носил ли повязку на глазу Кутузов?
  8. Вспомните, как выглядит статуя Родена «Мыслитель». Какой части головы касается его рука?
  9. Советские солдаты устанавливали флаг над немецким рейхстагом. Чтобы было изображено на флаге: серп, молот, звезда?
  10. Есть ли в глазницах черепа кость?

Готовьтесь снять трубку по первому звонку, кто знает — что там на другой стороне…

Необычные совпадения, эффект Манделы, сбои, глюки матрицы окружают нашу жизнь повсюду. Внезапно пламя на спичке больше не отбрасывает тень на стенах, а из памяти стираются достоверные факты истории.

До сих пор тайна: существует ли матрица, из которой можно было бы выбраться?

Сбои матрицы на экране: легендарные фразы больше не легендарные?

Привычное высказывание «Спасение утопающих — дело рук самих утопающих!» — наглая ложь, сбой и глюк матрицы. «Дело помощи утопающим — дело рук самих утопающих» — так верно. Кстати, Почтальон Печкин был не злой, а вредный, когда у него велосипеда не было! Еще одно недоразумение — отсутствие в истории факта, что Хрущев стучал ботинком по трибуне во время выступления на Ассамблеи ООН. А Ельцин, представьте себе, никогда не говорил фразу «Я устал, я ухожу!», вместо этого: «Я ухожу в отставку!».

Код матрицы, кажется, несовершенен, что подтверждают сбои и глюки

Сбои, глюки в «текстурах» матрицы или аномалии?

В Израиле, например, есть три дороги, в которых любая жидкость, вылитая на поверхность течет вверх, а не вниз. Еще один сбой или глюк матрицы — долина падающих птиц в горах индийского штата Ассам, где в августе с ночного неба падают птицы. В полуобморочном состоянии они даже не пытаются вырваться из рук.

В науке есть масса пробелов, которые не могут объяснить до сих пор великие гении

Конкретный сбой и глюк воображения происходит над морем возле замка Франка-Кастелло, где возникает сцена огромной битвы, слышатся крики и звон оружия. Историки допускают версию, что битва между греками и турками заблудилась во времени. Этот мираж, совпадение или глюк до сих пор необъясним.

Отличать реальность ото сна не всегда получается…

Грандиозный сбой в матрице происходил в 1994 году летом в Вашингтоне (штат Оаквилль), когда на жителей города пошел дождь из… желе. После этого, все разом заболели гриппом, совпадение? А необъяснимый случай или сбой в матрице записали в историю, как природную аномалию, глюк.

Глюки матрицы происходят постоянно: код неверен?

Восстание клонов или невероятные совпадения в вашем городе

Встречали одинаковых людей в метрополитене, на автобусной остановке, в толпе рядом? Незнакомых между собой одинаково одетых женщин, мужчин… Глюки матрицы происходят где угодно: на стоянке, в аэропорту, музеях, театрах, супермаркетах. Невероятные совпадения и сбои в повседневной жизни заставляют нас зависнуть во временном парадоксе, удивиться и выстроить десяток непредсказуемых теорий о существовании матрицы.

Эффект близнецов часто встречается в самых необычных местах

Совпадения и сбои матрицы — вы были правы?

Вернемся к мини-тесту вначале статьи, чтобы узнать, живете ли вы в матрице со сбоями и невероятными глюками? Выдохните, если вы помните, что у Карлсона штаны белые, а смирительная рубашка Шурика в кадре — абсолютно черная. Глюк, совпадение, сбой? Мыслитель Родена кулаком упирается не ко лбу, а ладонью к подбородку, а еще:

Новая Зеландия находится к Югу от Австралии, а не к Северу

У старухи Шапокляк никогда не было зонтика в руках, представляете?

У статуй на о. Пасха действительно есть шляпы, погуглите!

Кутузов не носил на глазу повязку…

…и, наверное, как и вы не знал, что в глазницах черепа есть все-таки кость!

На флаге над немецким рейхстагом изображено все: серп, молот и звезда

Кто-то назовет совпадения, глюки или сбой в матрице последствиями Black Friday, теорией существования двойников или заговоров, флешмобом, пранком или возможностями фотошопа… А вы попробуйте выйти на улицу летом в закат, перед дождем, когда разряжен воздух! Сбой в матрице покажет «реальность» в фиолетово-розовых красках, даже без очков. Удивительно, правда?

Netflix рекомендует к просмотру «Черное зеркало», «Измерение 404» со всеми ответами о матрице!

Сбой матрицы: yarkaya — LiveJournal

Есть такая группа на ФБ, называется «Сбой матрицы». Там публикуют рассказы о совпадениях разной степени странности. Я уже лет десять как собираюсь рассказать историю про одно совершенно эпическое совпадение очень даже в духе этого жутковатого «сбоя матрицы» и все никак руки не дойдут. Вот, сегодня будем считать, что дошли.

В истории несколько частей, которые происходили в разное время.

Год примерно 1995-1996. Я часто хожу тусоваться и знакомиться на дискотеки в Рижской Еврейской общине. Обычно туда приходят плюс-минус одни и те же люди, которых уже за много лет успеваешь выучить, все со всеми по разу повстречались, расстались и снова повстречались. На входе никакого контроля, никаких билетов, поэтому иногда приходят люди со стороны, или кто-то приводит своих знакомых.

На одной из дискотек знакомлюсь с парнем. Зовут Юра, но «называй меня Майкл». Кто его привел, вроде как знаю, но очень приблизительно. Протанцевали вместе весь вечер, ходили гулять по центру города. Учится в техническом на факультете «полимеров», папа «в ансамбле Садко играет на домре-альт». Странный набор из того, что запомнилось, согласитесь. Даю телефон, конечно, никогда в жизни не перезванивает (99.99% моих знакомств заканчивались именно так).

Год 2018. В Латвии праздник Песни со множеством концертов. Случайно попадаю на концерт национальных меньшинств в церковь старой Гертруды. Поют православные хоры, играют русские народные инструменты. В том числе играет ансамбль «Садко» — средний возраст участников болтается возле семидесяти.

Вспоминаю историю про Юру с дискотеки, при первой же возможности захожу в интернет на страницу этого самого Садко. Домра-альт там есть, соответственно, узнаю фамилию. Домриста тоже зовут Юрий.

И тут же буквально сажусь на пол. Потому что Юра с такой фамилией, этого же возраста (старше меня на 4 года), блондин и смутно похожий — я точно не помню лица за такой давностью лет, работал со мной вместе на заводе в 2001 году. Более того, мы с ним одно время даже весьма активно флиртовали и касались руками в маршрутке, правда, дальше ничего не пошло.

Полезла на фейсбук и с пола уже решила не подниматься — некоторое время назад, когда я увлекалась йогой, аюрведой и прочей шизотерикой, френдила связанных с этим людей из Риги. Среди них оказался «тренер по даосским практикам», тантре и всякой подобной мутотени — тот же самый Юра.

сбой матрицы — Дискотека 80-ых — LiveJournal

Я недавно наткнулась прям носом на секонд где-то в Крылатском. По делам была, заблудилась и наткнулась.
В подвальчик ступеньки и ободранная дверь.

Зашла конечно-же.
.

Там уныло так. Но кое-что увидела интересное.
Купила, уволокла домой довольная.

За прилавком там была немногословная девочка. Очень какая-то размытая. Как будто недописанная акварель.

Оттуда я вышла и вдруг резко стемнело, похолодало. Словно я там была не десять минут, а часов пять.
Проверила время — удивилась.
Не пять, но два с половиной. Не может быть! Не может.
.

Но я знаю, что умею вываливаться из времени (ок ок. туплю просто), так что не удивилась.
Зашла сперва в аптеку в том же доме, что и секонд, только с другой стороны. Купила там витаминков и капель в нос. Потом зашла в кондитерскую. Попила чаю. Вызвала такси и домой.

Ладно.
Долго ли коротко. Там же очутилась через неделю  по тем же делам. Но в секонд уже шла целенаправленно, вспоминая дорогу.

Вот слева Пятерочка, дальше банк, дальше Гемотест, и какая-то частная клиника с электронной вывеской. По вывеске бегут буквы. Мелкие. Похожие на букашек.

Дальше дом тот самый. Вон аптека, за ней кафе.
.

Вот только секонда нет.
.

Не просто нет. Даже двери нет. И ступенек. Окно в подвал есть. Забитое досками.

Я трижды обошла дом. Посмотрела все подъезды. Прошла вперёд, назад, вправо, влево. НЕТУ. НЕТ.

В аптеке спросила (аптекарша та же — кудрявая, в розовой маске, голос писклявый) где же секонд?  Аптекарша посмотрела поверх маски на меня странно. «Какой секонд»?
.

И в кафе подтвердили, что нет и не было.

А вещица та на месте. Я прибежала домой — сразу проверила. Я бы и мозги на мрт проверила.

Но такое со мной бывало тоже. Не часто, но бывало. Так что я приняла как должное.
Матрица шалит. Штож.
.


ну например Лена из офиса напротив. Мы курили все вместе. Разговаривали. Где-то с неделю. Из отпуска вернулась ее нет. А где Лена? Все такие «какая Лена? не было никакой Лены. я пытаюсь пояснить, вот такая, маленькая в серой кофте все время — на меня как на больную». Я бы предполжила троллинг и газлайтинг, но нет. Решила не уточнять. Не мешает.
..

Мама говорит, что привезла из Новосибирска два очень красивых цветка в горшках. Ооочень красивых, с такими яркими бутонами разных цветов. А мы поставили их на подоконник, потом открыли окно (была зима), и цветы все померзли, облетели налысо, одни веточки остались, но и они долго не протянули.

Что в этой истории не так?

а) у меня тогда была фотографическая чесотка и я фоткала ВСЕ красивое или интересное или кошку (это два в одном). цветов не помню, не фотографировала эту неземную красоту почему-то

б) у нас в принципе не открывались форточки и окна, так как был еще советский деревянный «стеклопакет», намертво заткнутый несколькими поколениями ваты.

в) даже если бы мы что-то открывали, то у нас кошка и 3 этаж, отсюда следует, что мы ничего не открывали.

А мама помнит и готова про каждый цветок в подробностях рассказать, даже в каких они горшках были
.

У меня так в магазине с полкой было. Целый стеллаж даже!

Пропал

Исчез

Совсем.

Вчера был, я купила товар почти перед закрытием мага.

Утром на завтра прихожу — стеллажа нет.

И товара нет.

Все вокруг есть, а его нет.

Спрашиваю у консультанта, она на меня смотрит и понижимает плечами. За ночь убрать весь товар? И куда его дели? А товар почему не продают? На что консультант сказала, что совсем не понимает о чем я говорю.
.
 в этом году обнаружила фильм, которого нет. Четко помню сцены из него, диалоги. Точнопомню что смотрела его в начале-середине 2000х. Колин Фаррелл в главной роли. Я на всякий случай ВСЕ фильмы Фаррелла пересмотрела. Нет такого фильма
.
О, у меня в Минске есть улица, куда я ездила гулять лет в 13-14, вот офигенно было там просто ходить. Потом как-то долго не было времени, а когда появилось, не смогла найти. Все вокруг есть, а ее нет. Причем я до мелочей все на ней помню
.

А у меня было так — сидим мы в офисе с нашим бухгалтером и разговариваем. А муж мой тогдашний тоже с нами работал. Она говорит — Игорю же 32. Я говорю, 30. Она говорит, ну как же, он же 1974 года. Я отвечаю, 30, я что, не знаю сколько ему лет?! он 1976-го года. Она наставивает на своём и достает ксерокопию его паспорта. Там четко, не размыто отпечатан год 1974.

Я в шоке. Приношу его настоящий паспорт — серия и номер сходятся! Но я и так знаю, что паспорта мы не меняли! Что это было — не понял никто..
.
 уэллсовская волшебная лавка не просто живет и здравствует, но и филиалов наоткрывала за это время
.


1001 подобных историй описывают в группе «Сбой матрицы». Чудо на чуде. Необъяснимым образом исчезают дома и вещи появляются люди, книжки, игрушки… В общем, вы не одиноки!

https://www.facebook.com/lala.brynza/posts/4826995140680545

55 фотографий со странными явлениями: сбой матрицы или фотошоп?

55 фотографий, которые могут обрадовать поклонников теории, что наш мир — это матрица.

А вы верите, что мы на самом деле живем в матрице? Это конечно вряд ли. Но вы не поверите в мире оказывается есть много людей, которые действительно думают, что наш мир виртуальный? Думаете, что это чушь и в это верят малообразованные люди, которые похожи на адептов псевдонаучных теорий? Вы не поверите, но эту теорию, то что мы живем в компьютерной симуляции не раз обсуждали известные на весь мир физики. Плюс добавьте сюда популярность трилогии фильма «Матрица», у которой миллионы поклонников по всему миру, и вы уже не будете так удивлены такой теорией.

 

Сегодня мы решили собрать большой сборник самых популярных фотографий в Сети, на тему «сбой матрицы» или «фотографии, доказывающие что мир компьютерная симуляция» и т. п. Многие снимки в нашей подборке, которые вызвали в Интернете бурное обсуждение, скорее всего прошли через Фотошоп. Но есть и такие фото, которые вероятно не подвергались редактуре. Вот такие снимки вызывают больше вопросов, чем ответов. Надеемся наша подборка будет интересна не только тем, кто считает, что наш мир — это матрица в компьютере вселенной. 

 

1. Виноград двух цветов

 

2. В тени надписи на стене не хватает одной буквы

 

3. Пламя свечи появилось не там, где должно

 

Смотрите также

 

4. Пикселизированная тень

 

5. Облако похожее на НЛО

 

6. Птица сидит в воздухе

 

 

7. Велосипед на фотографии не соответствует отражению в луже 

 

8. Этот человек потерял складку на безымянном пальце

 

Смотрите также

 

9. Буферизация здания

 

10. Этот красный и этот зеленый виноград вырос из одной и той же лозы

 

11. Странный лимон. Как будто ошибка в коде

 

12.Телевизора в отражении не соответствует тому, что показывает реальный телевизор

 

13. Кот того же цвета и рисунка, что и пол

 

Смотрите также

 

14. Это здание выглядит как компьютерный глюк

 

15. У этой девушки, похоже есть клон

 

16. Тень не соответствует форме провода

 

17. Странный длинный виноград

 

18. Яйцо, которое курица снесла без скорлупы

 

19. В облаках появилась водная рябь

 

20. Черная машина была очищена настолько хорошо, что стала зеркалом

 

Смотрите также

 

21. Деревья выглядят так, как будто они созданы в видеоигре

 

22. В одном музыкальном классе сидит несколько копий одного человека. Или это разные люди? Или Фотошоп? Есть версии?

 

23. Этот дом был окрашен в цвет похожий на небо, в результате чего здание почти исчезло из виду

 

24. Кто-то выложил в Сеть фотографию здания, которое похоже на плоский лист бумаги

 

25. Этот картотечный шкаф настолько сияет и блестит что исчезает прямо на глазах

 

26. Отражение в экране телефона создает частичный эффект невидимости смартфона

 

27.  Коридор этого отеля выглядела так, будто ведет к некоему порталу в другую вселенную

 

28. Этот футболист, что одновременно играл за две футбольные команды?

 

Смотрите также

 

29. Автобус полон одинаковыми пассажирами. Вы как думаете Фотошоп?

 

30. Эти пары впервые встретились на фестивале в одной и той же одежде

 

31. Эти отдельные фотографии чьих-то родителей идеально сочетаются друг с другом

 

32. Радуга вышла из мусорного контейнера. Вот откуда она берется))

 

33. У этой кошки на подушечках лап есть в виде рисунка их точная копия 

 

34. Лапа собаки выглядит точно так же, как ее морда

 

35. Горный снег растаял в форме ящерицы

 

36. Тень с надписью «собака» (DOG) попала прямо на собаку

 

37.  Тапочки этого человека смешались с ковром его дома

 

38. Платье этой девушки соответствует расцветки коробки

 

39. Кот проник сквозь цементную стену

 

40. Странный цветок

 

41. Бревно похоже на голову лошади

 

42. Нескольких радуг в небе

 

43. Пластиковый пакет принял форму кошки

 

44. Волосы этой девушки идеально завиты в форме цифры 5

 

45. Этот столб создавал впечатление параллельной вселенной

 

46. Эти двое собак находятся друг к другу так близко, что стали похожи на двуглавую собаку

 

47. На этом снимке, создается ощущение, что верхняя часть тела человека левитирует (хотя на самом деле человек сидит)

 

48. Учитель, встав на колени, создал странную иллюзию

 

49. Эта простынь приняла форму человека

 

50. Этот человек нашел свой портрет, который был сделан еще до его рождения

 

51. Это зеркало на ступенях создало, что лестница находится в небе

 

52. Отражение потолочной люстры в окне выглядело так, как будто оно парит в небе

 

53. Линии на этом листе с дерева точно соответствуют складкам руки человека 

 

54. Этот камень посреди скамейки выглядит как какая-то неисправность в видеоигре

 

55. И, наконец, рисунок этих облаков сбился так, как будто в программе матрицы произошла ошибка

 

Отказ матрицы – обзор

2.3.1.4 Критерии Larc03

Критерии Larc03 представляют собой критерии плоского напряжения, разработанные Davila et al. (2005). Расширение критериев Larc03 для включения общей трехмерной нагрузки и нелинейности сдвига в плоскости было выполнено Pinho et al. (2005). Подобно критериям Хашина, критерии Larc03 состоят из набора из шести критериев разрушения для различных режимов разрушения композитов. Критерий Larc03 для разрушения матрицы при поперечном сжатии σ2<0 основан на теории разрушения Мора-Кулона и задается следующим уравнением:

(2.где α 0 — угол ориентации плоскости разрушения, разрушенной поперечным сдвигом при нагружении чисто поперечным сжатием, и для большинства однонаправленных графито-эпоксидных композитов он равен α0=53±2°, α — угол плоскость разрушения при комбинированных нагрузках σ 2 и τ 12 , а остальные определены ранее.В уравнении (2.19) прочность на сдвиг S равна , а не значение прочности пластины S , чтобы учесть сдерживающее влияние соседних слоев на существенное увеличение прочности на сдвиг отдельной пластины, и его расчет будет дан позже. Для данной комбинации σ 2 и τ 12 , α должно быть определено итеративно в диапазоне от 0 до α 0 , так что объединенные члены .19) максимально.

С другой стороны, критерий Lar03 разрушения матрицы при поперечном растяжении σ2>0 выводится из анализа разрушения щелевой трещины в слое ламината, как показано на рис. 2.9. Эффективная щелевая трещина с размерами 2a0×2aL используется в модели для представления макроскопического эффекта нарушения связи между матрицей и волокнами, возникающего в ламинате на микромеханическом уровне из-за производственных дефектов или остаточных термических напряжений. Соответствующий выбор a 0 и a L для использования в анализе зависит от рассматриваемого материала.Тогда критерий разрушения матрицы при поперечном растяжении может быть выражен как

Рисунок 2.9. Модель щелевой трещины для прогнозирования разрушения матрицы при растяжении по критериям Larc03.

(2.21) 1-Gσ2yist + Gσ2yist2 + τ12sis2 = 1

где

(2.22) g = giclgiicl = gictgiict = λ220λ440yistsis2

(2.23) λ220 = 21E2-ν212e1λ440 = 1G12

г IC ( L) и G IIc (L) представляют собой трещиностойкость в режимах I и II в продольном (волоконном) направлении, тогда как G Ic (T) и G IIc (T) представляют собой аналогичную трещиностойкость ударная вязкость, но в поперечном направлении; Y is t и S is представляют собой прочность на поперечное растяжение и продольный сдвиг на месте, и их выражения зависят от трех идеализированных конфигураций щелевой трещины в слое ламината; обнаружено, что все они не зависят от размера продольной щели a L :

Случай 1 : Щелевая трещина, которая охватывает только несколько слоев из большого количества кластерных слоев в ламинате 2a0≪t

(2.24) Yist=2GIcTπa0Λ220Sis=2GIIcTπa0Λ440

, где a 0 — половина длины поперечного размера щели. Случай 1 представляет собой макроскопический эффект нарушения связи между матрицей и волокнами в толстом ламинате, где трещина будет расти в поперечном (по толщине) направлении.

Случай 2 : Щелевая трещина, проходящая через все кластерные слои ламината где трещина уже распространяется на всю толщину кластерных слоев и в последующем будет расти в продольном направлении.

Случай 3 : Щелевая трещина в толстом однонаправленном ламинате ε11Xεt=1

Однако разрушение волокна при сжатии регулируется тремя отдельными критериями, в зависимости от уровня перекручивания при сдвиге и повреждения поддерживающей матрицы, вызывающего коллапс волокна. Кроме того, поскольку несовершенство выравнивания волокон играет решающую роль в прочности композитов на сжатие, напряжения в слое возникают в системе координат смещения идеализированной локальной области волнистости, как показано на рисунке 2.10 следует использовать при прогнозировании прочности композитного материала на продольное сжатие. Другими словами, критерии разрушения волокна при сжатии должны быть выражены в терминах этих локальных напряжений в слое. Напряжения в слое в системе координат несоосности даны как

Рисунок 2.10. Смещение волокон из-за волнистости ламината.

(2.28) σ1m = σ1COS2φ + σ2sin2φ + 2Cosφsinφτ12σ2m = σ1sin2φ + σ2cos2φ-2Cosφsinφτ12σ12m = -σ1sinφcosφ + σ2sinφcosφ + cos2φ-sin2φτ12

, где

(2.29)φ=τ12+G12−XcφcG12+σ1−σ2φc=tan−11−1−4SisXc+ηLSisXc2SisXc+ηL

Разрушение при сжатии волокна за счет образования полосы перегиба со сжатием матрицы определяется уравнением, аналогичным уравнению (2.19) но при α=0 и τeffT=0, поскольку в перегибе волокна преобладает напряжение сдвига τ 12 , а не поперечное напряжение σ 22 . Таким образом, критерий разрушения волокна при сжатии деформацией излома при сжатии матрицы может быть выражен следующим уравнением:

(2.30)τ12m+ηLσ2mSis=1

При умеренном уровне сжатия волокна при высоком уровне сжатия матрицы возможно повреждение матрицы без образования перегибов или повреждения волокна. Критерий отказа в этом случае должен принимать полную форму уравнения (2.19), т.е. Разрушение волокна при сжатии из-за перегиба при натяжении матрицы определяется критерием разрушения, аналогичным уравнению (2.21), то есть

(2.33)1−gσ2mYist+gσ2mYist2+τ12mSis2=1

Таким образом, критерий Larc03 состоит из набора шести критериев для шести различных режимов отказа, и они задаются соответственно уравнениями (2.19) , (2.21), (2.27), (2.30), (2.31) и (2.33).

Матричный режим разрушения – обзор

3 Теории разрушения с учетом физических соображений

Хашин [13] в 1980 г. исследовал критерий Цая–Ву [12] на предмет его способности отображать разрушение однонаправленных композитов.Он отметил, что представление разрушения при плоском напряжении одной эллипсоидальной поверхностью, заданной уравнением. (9), подходит не во всех ситуациях. Особая трудность, как он указал, была связана с коэффициентом прочности F 12 в уравнении. (9). Как предложили Цай и Ву [12], этот коэффициент можно получить с помощью двухосного теста. Однако, как отмечает Хашин [13], полученные в результате таких испытаний значения F 12 могут быть неприемлемыми по физическим причинам.Он указал, что для двухосного растяжения теста уравнение. (9) дает F 12 , которая зависит от прочности на сжатие в волокне и поперечном направлениях. Это явно не разумно. На самом деле трудности с F 12 заключаются в том, что он не имеет однозначного значения, а зависит от напряженного состояния, используемого для его оценки. На самом деле оно может иметь любое значение, ограниченное первым из условий в уравнении. (10), т.е.

(12)-1XX’YY’

, где уравнение.Использована формула (11), а значения прочности при растяжении и сжатии выражены с одним и тем же знаком. Ограничение на F 12 , выраженное уравнением Таким образом, (12) включает в себя прочность на растяжение, а также на сжатие в направлении волокна и поперечном направлении. Нет никаких доказательств, подтверждающих такое поведение однонаправленных композитов. На самом деле указанное ограничение является чисто результатом требования замкнутости эллипсоидальной поверхности. Таким образом, это не связано с каким-либо наблюдаемым или ожидаемым физическим поведением однонаправленных композитов при плоском напряжении.

Хашин [13] предложил не требовать единой (непрерывной) гладкой поверхности в качестве представления однонаправленной прочности композита, а вместо этого разрешить кусочно-гладких поверхностей, каждая ветвь которых представляет отдельный вид разрушения. Это ограничивает взаимодействие компонентов напряжения соответствующими режимами отказа и позволяет избежать трудностей типа, отмеченного выше с F 12 в критерии Цая-Ву. Затем он приступил к изучению отдельных режимов отказа.

Хашин [13] предложил отделить режимы отказа волокна от режимов отказа матрицы. Для каждого типа отказа Хашин утверждал, что управляющие взаимодействия напряжений должны быть выражены квадратичными полиномами, поскольку только линейные члены, как правило, будут недостаточными, а большее количество членов, чем квадратичные, сделает результирующие критерии отказа непрактичными. При формулировании квадратичных критериев разрушения Хашин прибегал к инвариантам напряжений для трансверсально-изотропной симметрии, утверждая, что однонаправленные композиты обычно имеют случайно распределенные волокна в поперечном сечении.

Для условий плоского напряжения в однонаправленном композите критерий Хашина для моды растяжения волокна, σ 1  > 0, принимает следующую простую квадратичную форму.

(13)σ1X2+σ6T2=1

Для сжатия вдоль волокон σ 1  > 0 Хашин просто поставил σ 1     = Y этот режим отказа на основании недостаточного знания эффекта.

Что касается режимов разрушения матрицы, Хашин предположил, что плоскость разрушения, проходящая через матрицу (т. е. между волокнами), существует таким образом, что критические компоненты нормального и поперечного растяжения на плоскости определяют ее наклон. Концепция разрушения (декогезии) на плоскости фактически является классической, она была предложена для разрушения грунтов Мором в 1905 г. и ранее Кулоном в 1776 г. компоненты σ ij , то функция разрушения для этого режима может быть записана как наклон между поперечной осью x 2 и нормалью к плоскости.

Для условий плоского напряжения в однонаправленном композите Хашин вывел следующий критерий для матричного режима растяжения σ 2  > 0

(15)σ2Y2+σ6T2=1

и для режима разрушения при сжатии σ 2  < 0

(16)σ22T′2+Y′2T′2-1σ2Y′+σ6T2=1

, где штрих у Y представляет числовое значение прочности на сжатие по нормали к волокнам, и штрих в T — это прочность на сдвиг в плоскости, пересекающей волокна («прочность на поперечный сдвиг»), а значение без штриха — это обычная прочность на сдвиг в плоскости, параллельной волокнам («прочность на осевой сдвиг»).

Проблема определения прочностных констант в уравнении. (16) сделал критерий неосуществимым.

Основываясь на своей более ранней работе на немецком языке, Пак [14] взял предложенный Хашином подход к видам отказа матрицы и развил его дальше. Переименовав терминологию режима разрушения матрицы Хашина в режимы межволоконного разрушения (IFF), Пак и Шюрманн [15] предложили сложную процедуру для оценки наклона плоскости разрушения и критических тракций на плоскости.

Чтобы понять природу теории Пака, см. рис.7, на которой показаны три компонента тяги σ n , τ nl и τ nt , действующие на плоскости разрушения. Эти компоненты тяги вместе с углом наклона θ fp плоскости являются переменными в теории Пака. Как описано в Puck et al. [16] функция f E ( θ ), называемая коэффициентом воздействия напряжения или «риском разрушения», определяется на основе предложений Хашина [13], и разрушение предполагается на плоскости, где эта функция принимает его максимум относительно угла θ .

Рис. 7. Показана плоскость разрушения с углом наклона θ fp относительно оси x 3 и разрешенным нормальным напряжением σ n 50l3019 и касательными напряжениями и τ nt действующие на плоскости. Из [15].

Семь параметров (или констант материала) в теории Пака для IFF – это три константы прочности и четыре так называемых «параметра наклона». Последние представляют собой характеристические углы на «основных кривых», которые представляют собой графические изображения предполагаемых квадратичных взаимодействий между нормальным и поперечным растяжением в плоскости разрушения (см.8). Взаимодействие между растяжением σ n и любым из двух сдвиговых усилий на плоскости разрушения предполагается эллиптическим, как и в большинстве других теорий, а это взаимодействие для случая сжатия σ n считается параболическим. . Аргумент в пользу параболического предположения заключается в том, что наличие сжимающей нормальной тяги препятствует разрушению, вызванному сдвигом в плоскости разрушения. Параметры наклона (обозначаемые p с нижними индексами, относящимися к растяжению, сжатию или сдвигу) представляют собой углы относительно оси σ n , касательные к основным кривым в точках соединения между эллиптической и параболической кривыми. части мастер-кривых, как показано на рис.8.

Рис. 8. Сечения эталонной поверхности разрушения для ψ  = 90° и ψ  = 0°. Из Puck et al. [16].

Для «идентификации» семи констант теории Пака необходимы значительные данные испытаний. Насколько это оправдано по отношению к другим теориям отказа, оценивается в других работах [1,2]. Цель этой работы состоит в том, чтобы изучить предположения в свете наблюдаемых механизмов отказа в композитах, чтобы оценить обоснованность теорий отказа.С этой целью предлагаются следующие комментарии.

И теория разрушения Пака, и подход Хашина к разработке критериев разрушения для однонаправленных композитов рассматривают композиты как однородные твердые тела. Наличие волокон учитывается путем различения режимов отказа волокна и режимов отказа, которые, как предполагается, происходят без воздействия на волокна. Последние назвали матричные режимы отказа в Hashin [13] и режимы межволоконного отказа в Puck et al. [14,15], распознают волокна только с точки зрения их направления, так что предполагаемая плоскость отказа параллельна волокнам, т.е.е. не разрезает волокна. Матрица, в которой находится предполагаемая плоскость отказа, не имеет явного влияния волокон, т.е. из-за возмущения локального поля напряжений или из-за разрушения интерфейса волокно/матрица. Таким образом, распределение волокон (однородное или неоднородное) и характер интерфейсов (слабое или сильное) явно не влияют на критическое растяжение предполагаемой плоскости разрушения или ее ориентацию. Предполагается, что семь материальных параметров в теории Пака несут все эти эффекты.Очевидно, что набор допущений относительно плоскости разрушения, отличный от тех, которые основаны на концепциях Кулона и Мора, используемых в подходах Хашина и Пака, приведет к другим параметрам материала. Таким образом, отсутствие явного учета присутствия волокон также приводит к отсутствию уникальности параметров материала. Кроме того, предполагаемое отсутствие какой-либо прогрессии в процессе разрушения вводит еще одно приближение, которое нелегко оценить.

Почему Воскрешения Матрицы провалились в прокате

Внимание: СПОЙЛЕРЫ для Воскрешения Матрицы .

Воскрешения Матрицы ‘плохие кассовые сборы после его выпуска заставили некоторых задуматься, почему последний фильм «Матрица » так эффектно провалился. Выпущенный спустя 22 года после первого новаторского фильма  Матрица  , режиссер Лана Вачовски возвращается к своей антиутопической смоделированной реальности вместе с оригинальными звездами франшизы Киану Ривзом и Кэрри-Энн Мосс, чтобы продолжить соответствующие сюжетные линии Нео и Тринити.Тем не менее, несмотря на попытку использовать щедрые резервы ностальгии Матрица , Воскрешение Матрицы не удалось вернуть магию кассовых сборов оригинальной трилогии с низкими продажами билетов в течение нескольких недель после его выпуска.

Воскрешение Матрицы происходит примерно через 60 лет после кульминационных событий Революции Матрицы , в центре которых находится успешный разработчик видеоигр Томас Андерсон.Игры Томаса основаны на его смутных воспоминаниях о Нео, причем Томас регулярно не может отличить сны от реальности, поскольку его прошлое, как « Тот самый », продолжает подавлять его сознание. Неизбежно Томас извлекается из симуляции, чтобы снова стать Нео и спасти Тринити от последней версии Матрицы Аналитика (Нил Патрик Харрис).

Связанный: Почему боевые сцены в «Воскрешениях» хуже, чем в оригинальной трилогии «Матрица»

Тем не менее, несмотря на то, что фильм «Матрица воскрешения » стал громким призывом к сентиментальности старых фильмов «Матрица », он стал полным провалом кассовых сборов.От неспособности оправдать свои амбициозные валовые прогнозы до получения противоречивых критических отзывов, The Matrix Resurrections , несомненно, изо всех сил пытался оправдать шумиху, которую изначально раздули его скромные маркетинговые усилия. Вот почему фильм : Воскрешение Матрицы взорвал кассовые сборы, в том числе взгляд на его противоречивые обзоры и производительность потоковой передачи HBO Max.

Сколько Matrix Resurrections собрали в прокате (и сколько это стоило)

По состоянию на 2 января 2022 года игра The Matrix Resurrections собрала 30 долларов США.9 миллионов в США и Канаде и 75,1 миллиона долларов на других территориях, на общую сумму 106 миллионов долларов по всему миру. В Соединенных Штатах прогнозировалось, что The Matrix Resurrections  соберет более 40 миллионов долларов в 3552 кинотеатрах за первые пять дней после выхода на экраны, при этом несколько СМИ смело предсказывали, что четвертый фильм Matrix принесет более 70 миллионов долларов в свой первый. шесть дней. Однако, несмотря на эти прогнозы, The Matrix Resurrections сильно отстали, собрав всего 12 миллионов долларов за первые выходные.Эти цифры еще более возмутительны в контексте гигантского производственного бюджета, когда на создание фильма Ланы Вачовски ушло 190 миллионов долларов.

Почему Воскрешения Матрицы провалились в прокате

Как и многие другие известные фильмы 2021 года, Воскрешение Матрицы — несомненная жертва продолжающейся пандемии COVID-19, которая привела к сокращению количества зрителей почти на всех территориях по всему миру. Воскрешения Матрицы открылись за три дня до Рождества всего в 2151 кинотеатре в США и Канаде, что подчеркивает продолжающееся отсутствие интереса к личному просмотру новых выпусков. Отсутствие продаж билетов на фильм усугублялось его близостью к кинематографическому бегемоту «Человек-паук: Нет пути домой », который вошел в десятку самых кассовых фильмов всех времен по состоянию на 2 января 2022 года и был выпущен всего за пять дней до этого. Воскрешение Матрицы . По сути, это гарантировало, что Воскрешения конкурировали с франшизой и фан-базой в MCU, которые намного превосходят его собственные, что привело к его анемичным кассовым сборам, поскольку зрители предпочли выдержать резкие скачки числа Коронавируса для Человека-паука, а не для Нео в перегруженный кинематографический праздничный период. .

Тем не менее, The Matrix Resurrections ‘ проблемы гораздо глубже, чем его график выпуска, поскольку маркетинг фильма в преддверии его выпуска был не чем иным, как подпольным.В отважной попытке сохранить в тайне свой широко обсуждаемый сюжет, «Матрица Воскрешения» развернули секретную серию трейлеров и тизеров, которые мало что сделали для того, чтобы вызвать интерес к фильму за пределами его основной демографической аудитории. Воскрешения Матрицы также получили неоднозначные отзывы, и критики решительно разделились во мнениях относительно того, удалось ли Воскрешения стать достойным продолжением Матрицы или даже отдельным фильмом. Теплый комментарий к фильму «Матрица: воскрешения » мало что сделал для того, чтобы убедить не фанатов «Матрицы» покупать билеты, еще больше подпитывая замкнутый круг только фанатов ранее существовавшей франшизы, которые смотрели фильм — с его низкими кассовыми сборами, доказывающими отсутствие «Воскресения ». агентства за пределами аудитории своего жанра.

Связанный: Объяснение реткона Matrix Resurrections

Были ли Matrix Resurrections успешными на HBO Max (и повредили ли они кассовым сборам)?

Тем не менее, одна область, в которой Воскрешение Матрицы действительно преуспела после немедленного выпуска, — это количество просмотров HBO Max, а потоковая платформа сообщила о впечатляющих 2.8 миллионов умных телевизоров в США посмотрели сиквел в течение первых пяти дней после его выпуска. Эти данные от HBO ставят « Воскрешения » в один ряд с некоторыми из лучших ранних исполнителей платформы, такими как « Отряд самоубийц », подчеркивая интерес к фильму после его неудач в прокате. «Воскресения матрицы» также является последним фильмом Warner Bros. Pictures, который был одновременно выпущен в течение 30 дней на потоковом сервисе HBO Max, который изначально использовался для снижения низких продаж билетов в ответ на пандемию COVID-19.

Распространено мнение, что одновременный выпуск фильма между HBO Max и кинотеатрами нанес ущерб Воскрешениям матрицы кассовым сборам, но его совместный выпуск вряд ли стал основным фактором, повлиявшим на его неспособность генерировать доход.Другие столь же разрекламированные функции, такие как Dune Дени Вильнева, также были выпущены в кинотеатрах и на HBO, но Dune превысила 300 миллионов долларов по всему миру по состоянию на 2 ноября 2021 года, всего через 11 дней после его первоначального выпуска. Кассовые сборы « Дюна » и другие подобные функции укрепляют идею о том, что «: Воскрешение матрицы» провалился из-за его повествовательных достоинств и жесткой конкуренции MCU, а не из-за того, что он был доступен для потоковой передачи для домашней аудитории.

Всегда ли Matrix Resurrections будет кассовой бомбой?

В течение нескольких недель после выхода фильма «Матрица: воскрешения » было ощутимое чувство шока от того, насколько плохо фильм показал кассовые сборы в стране: фильм закончился примерно на 50 миллионов долларов меньше, чем его самые высокие стартовые пятидневные оценки. .Тем не менее, Warner Bros., несмотря на протесты, вполне возможно, переоценила интерес к современному сиквелу Matrix , даже пропитанному такой же ностальгией, как Resurrections . Статистика кассовых сборов оригинальной трилогии «Матрица » подтверждает это мнение, хотя и с оговоркой, что в то время каждый фильм все еще был чрезвычайно прибыльным для Warner Bros. Studios.

«Матрица » — это, несомненно, новаторский образец кинопроизводства, чье изменение границ научно-фантастического жанра обеспечило ему место в пантеоне великих фильмов.Первый Matrix собрал внушительные 466,6 миллиона долларов по всему миру, и зрители стекались, чтобы увидеть путь Нео к тому, чтобы стать «Избранным». «Матрица: перезагрузка» принес домой еще большую прибыль, составив 741,8 миллиона долларов по всему миру, однако отзывы о фильме были вялыми, особенно в отличие от гениальности и оригинальности его предшественника. Критики раскритиковали The Matrix Revolutions после выпуска, и хотя он по-прежнему приносил 427,3 миллиона долларов по всему миру, он представлял собой резкое падение прибыли по сравнению с предыдущей записью Matrix , поскольку интерес к антиутопическому миру Вачовски угас.

Эти цифры и снижение критических отзывов о франшизе, по сути, поставили The Matrix Resurrections в несостоятельное коммерческое положение, где что-либо меньшее, чем абсолютный шедевр, могло бы работать против четвертой части Matrix .В частности, в контексте выпуска COVID-19, фильм Вачовски « Matrix   Resurrections », по сути, делал ставку на то, чтобы поразить публику своими изменениями в истории Matrix и получить такие сильные отзывы, что кинозрители были вынуждены увидеть второе возрождение Нео в кинотеатрах. . Этого, конечно же, не произошло, что укрепило идею о том, что стремление вернуться в мир Матрица не было таким большим, как можно было бы предположить в таинственных маркетинговых кампаниях.Проще говоря; Воскрешения Матрицы всегда было суждено стать бомбой кассовых сборов, и ни график выпуска, ни количество стримов не могли скрыть тот факт, что волшебство, кажется, давно ушло из франшизы Матрица .

Далее: Объяснение окончания Matrix Resurrections: план аналитика и будущее Нео/Тринити

Роберт Паттинсон раскрывает необычные комиксы, которые вдохновили его Бэтмена

Об авторе Чарльз Кэмерон (опубликовано 299 статей)

Чарльз Кэмерон — старший сценарист Screen Rant, специализирующийся на кино и телевидении.Б.А. Выпускник UEL, он провел несколько лет на корпоративных должностях, прежде чем полностью посвятить себя своей страсти к писательству. Уроженец Великобритании, Чарльз также является заядлым футбольным болельщиком и соавтором подкастов, который любит размещать новый контент в различных средствах массовой информации.

Другие работы Чарльза Кэмерона Провал

Resurrections в прокате убивает всю надежду на Matrix 5

«

: Воскрешение Матрицы» получил неоднозначные отзывы многих критиков, но его катастрофические кассовые сборы, вероятно, убили все шансы на «Матрицу 5».

Провал кассовых сборов Воскрешение Матрицы , вероятно, убил все шансы на появление Матрицы 5 . В течение почти 20 лет практически все считали, что франшиза «Матрица » закончилась навсегда, по крайней мере, в том, что касается основной серии фильмов. Революции Матрицы привели все к довольно убедительному завершению: Нео и Тринити, казалось бы, мертвы, и, по крайней мере, между людьми и машинами был установлен временный мир.Хотя этот фильм вызвал серьезные разногласия, он, по крайней мере, показал завершение истории.

Затем последовали Воскрешения Матрицы до конца 2021 года. Киану Ривз вернулся в роли Нео, Кэрри-Энн Мосс вернулась в роли Тринити, и даже соавтор Матрицы Лана Вачовски вернулась к режиссуре.Многие возлагали большие надежды на это грандиозное возвращение в матричный мир, но, к сожалению, реакция на Воскрешение Матрицы была в лучшем случае неоднозначной. Критики хоть и не были ужасными, но и не очень хорошими. Реакция публики, возможно, была еще более разделенной, и, казалось, почти не было золотой середины между любовью к сиквелу и ненавистью к нему.

Связанный: Matrix Resurrections тратит впустую свою лучшую идею Morpheus

Те, кто действительно наслаждался Воскрешения Матрицы , возлагали надежду на материализацию Матрицы 5 .Несмотря на то, что Вачовски и Ривз преуменьшают вероятность, концовка Воскрешения явно оставляет дверь открытой для нового приключения с воссоединившимися Нео и Тринити. К сожалению, кассовые сборы фильма : Воскрешение Матрицы были вялыми, заработав всего 125 миллионов долларов по всему миру после нескольких недель выпуска. Это делает его самым кассовым фильмом из серии «Матрица » на сегодняшний день, и ему придется заработать в кинотеатрах еще 300 миллионов долларов, чтобы хотя бы обогнать «Матричные революции» по всему миру.

В то время как некоторые могут возразить, что потенциал кассовых сборов фильма Воскрешение Матрицы был снижен из-за его одновременного выхода на HBO Max, и в этом действительно есть некоторые основания, были и другие фильмы, выпущенные дома и в кинотеатрах, которые в конечном итоге оказались гораздо более успешными. выгодно.С заявленным бюджетом почти в 200 миллионов долларов, The Matrix Resurrections также имеет гораздо более долгий путь, чтобы даже начать получать прибыль для Warner Bros после маркетинговых затрат. Время покажет, совпал ли выпуск сиквела с всплеском подписок на HBO Max, что могло положить деньги в карманы WB. Даже в этом случае у него будет подъем в гору. Учитывая все это, у WB почти нет стимула инвестировать в создание Matrix 5 .

Можно задаться вопросом, мог бы фильм Воскрешение Матрицы ‘ показать себя лучше, если бы он был эксклюзивным для кинотеатров, но в то же время его посредственные отзывы, вероятно, навредили его имиджу как блокбастера, который требовал большого экрана и звука, которые может обеспечить только кинотеатр. .Если фильм не должен быть хорошим, у него меньше стимула выходить из дома, чтобы посмотреть его. Поляризованная реакция аудитории на фильм : Воскрешение Матрицы также, без сомнения, помешала ему восстановиться в прокате после небольшого первого уик-энда. Если только The Matrix Resurrections не является абсолютным монстром-бестселлером на домашнем видео, почти невозможно представить Matrix 5 , несмотря на то, что Matrix Resurrections его настраивают.Хорошо это или плохо, можно обсуждать.

Больше: каждый фильм HBO Max 2021 года от худшего к лучшему

Мэтт Ривз говорит, что «Бэтмен» — это именно тот фильм, которым он хотел его видеть

Об авторе Майкл Кеннеди (4317 опубликованных статей)

Майкл Кеннеди — заядлый фанат кино и телевидения, работающий в Screen Rant на различных должностях с 2014 года.За это время Майкл написал для сайта более 2000 статей, сначала работая исключительно в качестве автора новостей, а затем в качестве старшего автора и помощника редактора новостей. Совсем недавно Майкл помог запустить новый раздел ужасов Screen Rant и теперь является ведущим штатным автором, когда дело доходит до всего пугающего. Уроженец Флориды, Майкл увлечен поп-культурой и в 2012 году получил степень бакалавра искусств в области кинопроизводства. Он также любит фильмы Marvel и DC и желает, чтобы каждый поклонник супергероев мог просто ладить.Когда он не пишет, Майкл любит ходить на концерты, участвовать в профессиональных рестлингах и обсуждать поп-культуру. Майкл, давний член семьи Screen Rant, надеется продолжать создавать новый контент для сайта еще много лет.

Еще от Майкла Кеннеди

границ | Понимание недостаточности ципрофлоксацина в биопленке Pseudomonas aeruginosa: клетки-персистеры выживают при разрушении матрикса

Введение

Инфекции Pseudomonas aeruginosa , связанные с постоянными медицинскими устройствами, особенно трудно поддаются лечению из-за P.aeruginosa способность образовывать биопленку, защищающую от защитных сил хозяина и химиотерапии. Таким образом, лечение таких инфекций без механического рассеивания биопленки остается сложной задачей (Mulcahy et al., 2014; Høiby et al., 2015). Среди антибиотиков, необходимых для лечения биопленочных инфекций P. aeruginosa , широко используется ципрофлоксацин (Mensa et al., 2018; Masadeh et al., 2019), который является единственным пероральным антибиотиком против P. aeruginosa и диффундирует в самые глубокие слои биопленки (Anderl et al., 2000; Уолтерс и др., 2003). Несмотря на эти свойства, предыдущие исследования показали, что ципрофлоксацин не смог уничтожить биопленок P. aeruginosa даже в экспериментальных условиях, когда не было отобрано устойчивых мутантов (Spoering and Lewis, 2001; Pamp et al., 2008; Benthall et al., 2015; Павар и др., 2015). Действительно, неэффективность лечения часто была результатом отбора клеток-персистеров. Такие персистеры происходят от полностью чувствительных штаммов (Balaban, 2004), которые становятся невосприимчивыми к антибиотикам после фенотипического и обратимого переключения, вызванного факторами окружающей среды, голоданием и некоторыми другими активными или пассивными механизмами (Lewis, 2010; Lebeaux et al., 2014; Чиофу и Толкер-Нильсен, 2019 г.). Хотя это и не полностью выяснено, предполагается, что персистенция может быть результатом сниженной метаболической активности клеток в биопленке после индукции строгого ответа, ответа SOS, модулей токсин-антитоксин или даже других неизвестных механизмов (Mah and O’Toole, 2001; Viducic). и др., 2006; Амато и др., 2014; Хармс и др., 2016).

Поскольку механизмы и кинетика толерантности биопленки P. aeruginosa к ципрофлоксацину еще полностью не изучены, мы исследовали влияние ципрофлоксацина на структуру биопленки и феномен переключения в сторону персистенции клеток, встроенных в биопленку, с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) и транскриптомный анализ.

Материалы и методы

Бактериальный штамм и модель биопленки

Эксперименты проводились с эталонным штаммом PA14 дикого типа. МИК ципрофлоксацина и профилактическая концентрация мутанта для PA14 составляли, соответственно, 0,125 и 4 мг/л, что было определено, как описано ранее (Wiegand et al., 2008; Díez-Aguilar et al., 2015). Концентрация, препятствующая мутации, представляет собой концентрацию, которая ингибирует рост наименьшего мутанта первой ступени, соответствующую экспериментально самой низкой концентрации, которая не допускает роста колонии, когда более 10 10 клеток наносят на чашки с агаром, содержащим лекарство [ципрофлоксацин] ( Дрлица, 2003).Для модели биопленки ночные культуры штамма P. aeruginosa PA14 в бульоне Мюллера-Хинтона (MHB) разводили до оптической плотности 600 нм 0,01 в MHB. 3 мл бактериальной суспензии инокулировали в 6-луночные полистироловые культуральные планшеты и инкубировали в статических условиях при 37°С в течение 1 часа. Затем суспензию удаляли и заменяли 3 мл МГБ. Через 48 ч после образования биопленки лунки дважды промывали 1 мл 0,9% NaCl для удаления планктонных клеток и заражали ципрофлоксацином (Sigma-Aldrich, Франция) в течение 24 ч.

Оценка жизнеспособности клеток в биопленках с помощью анализа флуоресцеиндиацетата

Анализ диацетата флуоресцеина (FDA) основан на расщеплении неокрашенного FDA эстеразами метаболически активных жизнеспособных бактерий с образованием желтого флуоресцеина. FDA добавляли к обработанной биопленке через 24 часа воздействия ципрофлоксацина для измерения общей активности клеток биопленки и сравнения с необработанной биопленкой. FDA (Sigma-Aldrich, Франция) растворяли в ацетоне в концентрации 1 мг/мл. Рабочий раствор 1:5 FDA (об./об.) в 0.Перед каждым анализом готовили свежеприготовленный 9% NaCl. Биопленки формировали, как описано ранее. Затем 2-дневные биопленки, не подвергшиеся воздействию и подвергшиеся воздействию ципрофлоксацина (4–256 мг/л) в течение 24 ч, промывали 1,5 мл 0,9% NaCl перед добавлением 1,5 мл рабочего раствора FDA. Планшеты инкубировали в темноте при 37°С и через 240 мин измеряли оптическую плотность при 490 нм. Был проведен контроль, состоящий из МГБ без бактериальной взвеси. Данные были получены из трех независимых биологических повторов (Chand et al., 1994; Вананди и др., 2005 г.; Питерс и др., 2008).

Подсчет выживших культивируемых клеток в биопленке после обработки ципрофлоксацином в анализе биопленки Time-Kill

Pseudomonas aeruginosa Биопленки PA14 готовили, как описано выше, для подсчета колоний. Биопленки 2-дневной давности, не подвергавшиеся воздействию и подвергавшиеся воздействию ципрофлоксацина (4 мг/л) в течение 24 часов, затем механически диспергировали с помощью вортекса и мягкого воздействия ультразвуком. Клетки нумеровали через 1, 2, 4, 8, 12 и 24 ч воздействия ципрофлоксацина на чашки Mh3 без антибиотика или с ципрофлоксацином под номером 0.5 мг/л для обнаружения четырехкратно устойчивых мутантов к МИК. МИК ципрофлоксацина для выживших сидячих клеток, извлеченных из чашек Mh3 после 24-часового воздействия ципрофлоксацина, определяли с помощью Etest в соответствии с рекомендациями производителя.

Анализ биопленки с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии

Двухдневные биопленки P. aeruginosa PA14 готовили, как описано выше, на 6-луночных микропланшетах со стеклянным дном (NEST, Grosseron, France), подвергали или не подвергали воздействию 4 мг/л ципрофлоксацина в течение дополнительных 24 часов и анализировали. по КЛСМ.После обработки ципрофлоксацином биопленки дважды промывали 1 мл 0,9% NaCl. Затем оставшуюся прикрепленную к поверхности биомассу биопленки окрашивали путем добавления (i) 50 нМ Syto-9 (Invitrogen TM Molecular Probes TM ), зеленого флуоресцентного красителя для всех клеток и 1 мкг/мл белого калькофлуора ( Sigma-Aldrich), синий флуоресцентный зонд, маркирующий целлюлозу и другие экзополисахариды связями β-1,4, (ii) 50 нМ Syto-9 и 1 мкМ 1,3-дихлор-7-гидрокси-9,9-диметила -2(9H)-акридинон (DDAO) (Invitrogen TM Molecular Probes TM ), красный флуоресцентный зонд, мечящий внеклеточную ДНК (eDNA) и (iii) набор Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit ® для микроскопии ( Thermo Fisher Scientific) для дифференциации жизнеспособных и мертвых бактерий.Были выполнены два контроля, чтобы исключить флуоресценцию ципрофлоксацина. Сначала оценивали флуоресценцию только ципрофлоксацина при 405 и 488 нм, но флуоресценции не наблюдали, что свидетельствует об отсутствии аутофлуоресценции при этих длинах волн для ципрофлоксацина. Затем оценивали флуоресценцию известной концентрации целлюлозы и белого калькофлуора в присутствии ципрофлоксацина или без него: разницы между двумя условиями не наблюдалось (данные не показаны), что указывает на отсутствие влияния ципрофлоксацина на анализы CLSM.Двухдневную неэкспонированную биопленку также сравнивали с трехдневной неэкспонированной биопленкой для биомассы экзополисахаридов. Для визуализации и обработки 3D-изображений использовалась программа Zen 2.1 SP1 zen (Carl Zeiss Microscopy). Биомассу (мкм 3 ) биопленок измеряли с помощью программы COMSTAT2 (Givskov et al., 2000).

Данные были получены как минимум из трех независимых биологических повторов.

Экстракция РНК из биопленки для транскриптомного анализа

Pseudomonas aeruginosa Биопленки PA14 готовили для выделения РНК, как описано выше.Через 1 и 4 ч воздействия ципрофлоксацина биопленку удаляли из лунок путем осторожного воздействия ультразвуком в течение 90 с и соскабливая стерильным наконечником пипетки. Соскоб биопленки центрифугировали в течение 5 мин при 8000 g . Клетки из шести лунок 6-луночного культурального планшета объединяли. Наконец, осадок ресуспендировали в 1 мл 0,9% NaCl для двух стадий промывки. Для неэкспонированной биопленки использовали только один из 6-луночных планшетов в соответствии с тем же протоколом, который был описан ранее. Тотальные РНК экстрагировали с использованием набора Nucleospin RNA (Macherey Nagel, Hoerdt, France) и дополнительно обрабатывали ДНКазой (TURBO DNase free Ambion, Thermo Fisher Scientific) в соответствии с инструкциями производителя.РНК определяли количественно и анализировали на ее качество с использованием BioDrop µLITE (BioDrop Ltd., Кембридж, Великобритания), а отсутствие загрязняющей ДНК проверяли с помощью количественной ПЦР с использованием РНК RsmZ.

Количественная оценка экспрессии генов в биопленках с помощью количественной ПЦР с обратной транскрипцией

Уровни экспрессии девяти генов, перечисленных в разделе результатов, были проанализированы в 2-дневных биопленках, подвергшихся воздействию ципрофлоксацина (в концентрации 4 мг/л) в течение 1 или 4 часов, и по сравнению с необработанными биопленками. Синтез кДНК первой цепи осуществляли с помощью набора для обратной транскрипции OMNISCRIPT (Qiagen ®) с использованием стандартных лабораторных протоколов.Очищенные РНК использовали для одностадийной обратной транскрипции (ОТ) и амплификации ПЦР в реальном времени. Праймеры перечислены в дополнительной таблице S1. Условия циклирования ПЦР были следующими: 95°С в течение 5 мин и 40 циклов по 15 с при 95°С, 30 с при 55°С. Кривая плавления была построена в конце для оценки димеров праймеров и других артефактов. Относительную количественную оценку проводили из трех независимых биологических повторов. Данные были нормализованы по экспрессии гена 16S, и изменения кратности были рассчитаны в соответствии с методом 2 –ΔΔ Ct (Guyard-Nicodème et al., 2008). Ген считали сверхэкспрессированным, когда кратность изменения была как минимум в два раза выше в обработанных биопленках, чем в необработанных биопленках. Стабильность гена 16S в различных условиях была подтверждена путем сравнения соответствующих порогов циклов (ПЦ): 22,00 ± 0,53 для необработанной биопленки и 22,48 ± 0,96 для биопленки, обработанной ципрофлоксацином ( p > 0,05).

Статистический анализ

Результаты анализировали с использованием непарного теста Стьюдента t .Статистическую значимость принимали, когда значения p были <0,05.

Результаты

Жизнеспособность клеток в биопленке

Ципрофлоксацин в концентрациях, превышающих МПК, снижал жизнеспособность клеток, встроенных в биопленку, как показано в анализе FDA. Без ципрофлоксацина поглощение, измеренное в необработанной биопленке, составило 6,24 ± 1,28. После 24-часового воздействия ципрофлоксацина при концентрациях ≥ 4 мг/л сигнал значительно снижался ( p <0,05).Поглощение составляло 0,74 ± 0,37, 0,31 ± 0,10, 0,09 ± 0,07 и 0,11 ± 0,07 соответственно для концентраций ципрофлоксацина 4, 8, 96 и 256 мг/л (дополнительный рисунок S1). Концентрация ципрофлоксацина 4 мг/л, соответствующая профилактической концентрации мутантов, сквозная концентрация у взрослых, получавших пероральную дозу 500 мг два раза в день, и достижение у человека фармакокинетических/фармакодинамических (ФК/ФД) целей, связанных с клинической эффективностью ципрофлоксацина ( AUC 0 24 /МИК ≥ 125), приводило к ингибированию размножения клеток, о чем свидетельствует сигнал низкого поглощения в анализе FDA.

Что касается анализа времени уничтожения биопленки, начиная со среднего значения инокулята 7,9 log 10 КОЕ/мл, снижение количества бактерий на 3,0 log 10 КОЕ/мл достигается уже через 1 час, за которым следует 2,0 log 10 постепенное снижение КОЕ/мл от 1 до 12 часов и, наконец, плато 3,0 log 10 КОЕ/мл до 24 часов (подробности на дополнительном рисунке S2). Следует отметить, что среди выживших бактерий не было обнаружено ни одного резистентного мутанта (ни на чашках с четырехкратной МИК ципрофлоксацина, ни при измерении МИК ципрофлоксацина для выживших сидячих клеток).Наконец, после 24 часов обработки ципрофлоксацином как сигнал поглощения, так и инокулят выживших культивируемых клеток были значительно снижены по сравнению с необработанными биопленками.

Архитектура биопленки

Поскольку ципрофлоксацин оказывает вредное воздействие на жизнеспособность клеток, мы исследовали влияние воздействия антибиотиков на архитектуру биопленки. Без ципрофлоксацина 3-дневная биопленка была в значительной степени распределена по поверхности стекла, была прочной и компактной с максимальной и средней толщиной 50.2 и 33,2 мкм соответственно и грибовидные агрегаты материалов (рис. 1А, 2А, 3А). Биообъемы β-полисахаридов и общего количества клеток были стабильными между необработанными 2- и 3-дневными биопленками ( p > 0,05) (данные не показаны).

Рис. 1. Анализ с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) клеток Pseudomonas aeruginosa и β-полисахаридов в биопленке без воздействия (A) или после воздействия ципрофлоксацина в течение 24 часов (B) .Визуализация CLSM: общее количество клеток выделено зеленым цветом, а β-полисахариды выделены синим цветом после окрашивания Syto-9 и белым кальцинирующим флюором. Анализы CLSM: общее количество клеток (левая ось x ), β-полисахариды (левая ось x ), соотношение β-полисахаридов/общая плотность бактерий (правая ось x ). р < 0,05.

Рисунок 2. Анализ клеток Pseudomonas aeruginosa и внеклеточной ДНК в биопленке с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) без воздействия (A) или после воздействия ципрофлоксацина в течение 24 часов (B) .Визуализация CLSM: общее количество клеток выделено зеленым цветом, а внеклеточная ДНК выделена красным после окрашивания Syto-9 и DDAO (1,3-дихлор-7-гидрокси-9,9-диметил-2(9H)-акридинон). Анализы CLSM: общее количество клеток (левая ось x ), внеклеточная ДНК (левая ось x ), соотношение внеклеточной ДНК/общая плотность бактерий (правая ось x ). р < 0,05.

Рисунок 3. Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия (КЛСМ) анализ живых клеток и мертвых клеток в биопленке Pseudomonas aeruginosa , не подвергшейся воздействию (A) или подвергшемуся воздействию ципрофлоксацина в течение 24 часов (B) .Визуализация CLSM: живые клетки отмечены зеленым, а мертвые клетки — красным после окрашивания с помощью набора Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit ® . CLSM анализирует: живые клетки (левая ось x ), мертвые клетки (левая ось x ), соотношение живых/мертвых (правая ось x ). р < 0,05.

По сравнению с 3-дневной необработанной биопленкой воздействие ципрофлоксацина приводило к более разреженной биопленке с глубоким уменьшением толщины биопленки (максимум и среднее значение 21.0 и 18,5 мкм соответственно) и нарушение грибовидных структур (рис. 1В, 2В, 3В). Поскольку после воздействия ципрофлоксацина архитектура биопленки, по-видимому, была нарушена, были исследованы два основных компонента матрикса, т. е. экзополисахариды (рис. 1) и эДНК (рис. 2), а также соотношение живых клеток и мертвых клеток (рис. 3) с помощью специфическое окрашивание. Как показано на рисунке 1, синяя флуоресценция была значительно менее заметной после воздействия ципрофлоксацина, что свидетельствует об изменениях экзополисахаридов матрикса.Анализ COMSTAT показал, что биообъем β-полисахаридов заметно уменьшился с 0,91 ± 0,10 мкм 3 в необработанной биопленке до 0,06 ± 0,01 мкм 3 ( p < 0,05), а соотношение экзополисахаридов/общая бактериальная плотность снизилось с 1,4. ± 0,04 до 0,13 ± 0,03 ( p < 0,05). Как показано на рисунке 2, красная флуоресценция, маркирующая эДНК, была менее интенсивной после воздействия ципрофлоксацина, и наблюдались отверстия в структуре биопленки. Анализ COMSTAT показал, что биообъем кДНК уменьшился с 2.91 ± 0,96 мкм 3 до 0,88 ± 0,34 мкм 3 ( p = 0,05), тогда как отношение эДНК/общая плотность бактерий оставалось стабильным (0,84 ± 1,12 против 0,96 ± 0,14, p = ). Анализ жизнеспособности клеток с использованием набора для окрашивания Live/Dead (рис. 3) показал, что красная флуоресценция, соответствующая мертвым клеткам, была более интенсивной в биопленках, подвергшихся воздействию ципрофлоксацина, чем в контроле. Действительно, анализы COMSTAT количественно определили 1,8-кратное снижение процента живых клеток после воздействия ципрофлоксацина (количество живых клеток снижается с 45.5 ± 4,1 до 25,0 ± 4,3%, p <0,05) и 1,4-кратное увеличение процента мертвых клеток, что указывает на вредный эффект ципрофлоксацина, в соответствии с нашими предыдущими результатами, полученными с помощью анализа FDA и подсчета клеток. Однако, несмотря на то, что ципрофлоксацин приводил к значительной гибели бактерий и структурным нарушениям матрикса биопленки, чувствительные клетки все еще выживали в биопленке после воздействия антибиотиков.

Экспрессия генов в биопленке

Чтобы лучше понять адаптивные механизмы, лежащие в основе P.aeruginosa в биопленке при воздействии ципрофлоксацина, мы измерили динамику экспрессии генов, потенциально участвующих в устойчивости к антибиотикам (i) трех генов строгого ответа ( spoT , relA и lon ), о которых известно, что они участвуют в биопленке устойчивость к антибиотикам, (ii) два гена системы токсин-антитоксин HigB-HigA ( higB и higA ), потенциально участвующие в формировании персистеров, и четыре гена, участвующих в системе секреции III типа (T3SS, exsA ). , exsC , exoU и pcrV ) ключевой фактор вирулентности P.палочка . Все эти гены были количественно определены непосредственно из биопленки до воздействия антибиотиков и после 1 и 4 часов воздействия ципрофлоксацина в концентрации 4 мг/л.

Как показано на «тепловой карте», отображающей тенденции изменений экспрессии генов, полученных в трех биологических повторностях ( p > 0,1) (рис. 4), и по сравнению с необработанными биопленками, ципрофлоксацин, по-видимому, изменяет экспрессию генов. в биопленке через 1 ч экспозиции. Было измерено умеренное увеличение экспрессии трех генов строгого ответа, соответственно среднее значение 2.8-, 6, 4- и 9,1-кратное увеличение для spoT , relA и lon . Два гена системы токсин-антитоксин higB и higA были несколько более экспрессированы с увеличением соответственно в 4,1 и 4,6 раза, тогда как уровень экспрессии генов, связанных со ССТТ, оставался стабильным.

Рисунок 4. Уровни экспрессии генов строгого ответа, токсин-антитоксин и системы секреции III типа в биопленке Pseudomonas aeruginosa после 1 и 4 ч воздействия ципрофлоксацина по сравнению с неэкспонированной биопленкой.Результаты представляют собой средние значения из трех независимых экспериментов. Статистических различий нет ( p > 0,1).

После 4 часов воздействия ципрофлоксацина гены ССТТ все еще не были затронуты, а экспрессия генов токсин-антитоксин оставалась гиперэкспрессированной на том же уровне (примерно в четыре раза), тогда как гены, участвующие в строгом ответе, больше не подвергались значительному повышению (от в 1,4-2,4 раза). Таким образом, динамика экспрессии генов показала очень быструю адаптацию после воздействия ципрофлоксацина, поскольку гены, связанные со строгим ответом, сверхэкспрессировались уже через 1 час после антибиотика.

Обсуждение

Хотя в настоящее время известно, что биопленочные инфекции трудно искоренить из-за их повышенной устойчивости к противомикробным препаратам (Costerton et al., 1999; Donlan, 2001), переход к персистентному фенотипу все еще не полностью выяснен. В нашей работе, как и ожидалось, анализы CLSM, проведенные до воздействия антибиотиков, показали биопленку, состоящую из бактериальных клеток, заключенных в когезионный и структурно прочный матрикс, состоящий из эДНК и экзополисахаридов (Limoli et al., 2015; Морадали и др., 2017). Как и в других работах, ципрофлоксацин вызывал быстрое снижение плотности бактерий с последующим выживанием субпопуляции, не уничтоженной, несмотря на длительное воздействие антибиотиков (Pamp et al., 2008; Mulcahy et al., 2010; Reffuveille et al., 2014; Павар и др., 2015). Примечательно, что 24-часовое воздействие ципрофлоксацина вызывало глубокое разрушение матрикса биопленки. Недавно было описано, что β-лактам цефтазидим может ослаблять синтез полисахаридной матрицы P.aeruginosa PAO1 за счет снижения продукции экзополисахаридов Pel и Psl (Otani et al., 2018). Ясуда и др. (1993) также показали, что лечение кларитромицином снижает количество альгината и гексозы и приводит к уничтожению мембранных структур биопленки. Pel, уникальный экзополисахарид, продуцируемый P. aeruginosa PA14 (Colvin et al., 2011), как известно, сшивает эДНК в биопленке и играет важную роль в его способности взаимодействовать с др. ключевыми компонентами матрикса биопленки.Таким образом, уменьшение количества Pel может привести к нарушению матрикса биопленки. В нашем исследовании биомасса экзополисахаридов оставалась стабильной между 2-м и 3-м днем ​​в необработанных биопленках, но сильно снижалась на 3-й день после 24-часового воздействия ципрофлоксацина. Такое снижение биомассы, вероятно, частично связано с уменьшением плотности бактерий. Но резкое снижение соотношения экзополисахаридов/общая плотность бактерий после 24 часов воздействия ципрофлоксацина позволяет предположить, что продукция экзополисахаридов выжившими клетками также может быть нарушена.Механизм, лежащий в основе такого снижения выработки экзополисахарида после воздействия ципрофлоксацина, остается неизвестным, и исследование регуляторного каскада, ведущего к выработке Pel, безусловно, может быть многообещающим направлением исследований.

В нашем исследовании анализ времени уничтожения показал значительное снижение количества жизнеспособных клеток после обработки ципрофлоксацином, а анализ с помощью CLSM с использованием набора Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit ® показал увеличение количества мертвых клеток через 24 часа воздействия ципрофлоксацина. .Даже если ципрофлоксацин не вызывает непосредственно лизис бактериальных клеток, как это делают бета-лактамы, вмешиваясь в биосинтез клеточной стенки, было показано, что гибель клеток, вызванная фторхинолонами, и особенно ципрофлоксацин, может быть связана с образованием вакуолей и лизисом клеток, что приводит к при экструзии внутриклеточного содержимого (Elliott et al., 1987). В нашей модели биопленки мы могли ожидать высвобождения ДНК после гибели клеток биопленки, вызванной воздействием ципрофлоксацина.Но здесь наблюдалось уменьшение биообъема эДНК вместе с уменьшением биообъема экзополисахаридов, как сообщалось выше. Поскольку Pel колокализуется и физически взаимодействует с эДНК в биопленке (Jennings et al., 2015), можно предположить в качестве гипотезы, что эДНК не может быть сохранена и захвачена в биопленке из-за глубокого снижения содержания β-полисахаридов.

Несмотря на такое нарушение структуры биопленки, ципрофлоксацин не смог уничтожить биопленку, о чем свидетельствуют подсчет колоний и окрашивание живых/мертвых клеток через 24 часа воздействия ципрофлоксацина.Флуоресцентный анализ, используемый для оценки жизнеспособности клеток (Peeters et al., 2008), выявил интенсивную клеточную активность в необлученной биопленке, заметно сниженную после воздействия ципрофлоксацина. Соответственно, индуцированный антибиотиками покой ранее был показан как предположительно один из механизмов, вовлеченных в толерантность биопленок к антибиотикам (Amato et al., 2014). Для дальнейшего изучения молекулярных механизмов, участвующих в переключении на такую ​​сниженную метаболическую активность после воздействия антибиотиков, экспрессия генов строгого ответа была измерена непосредственно в биопленке.Уже через 1 ч после начала воздействия ципрофлоксацина гены строгого ответа spoT , relA и ген, кодирующий протеазу Lon, были в значительной степени сверхэкспрессированы, в то время как экспрессия генов вирулентности, таких как exsA , exsC , exoU и кодирование pcrV для T3SS практически не изменилось. Строгий ответ может вызвать снижение метаболической активности, особенно в биопленке, и, следовательно, способствовать толерантности биопленки. Действительно, предыдущие работы показали, что дефицитный P.aeruginosa двойной мутант ΔrelAΔspoT с нарушенной способностью продуцировать сигнальное соединение строгого ответа (p)ppGpp продемонстрировал более низкую толерантность к офлоксацину (Nguyen et al., 2011; Stewart et al., 2015). И наоборот, было показано, что P. aeruginosa T3SS действует как патогенетический фактор и фактор вирулентности (Diaz and Hauser, 2010). Недавно Ли и соавт. (2016) продемонстрировали, что субингибирующие концентрации ципрофлоксацина проявляют повышенную цитотоксичность в зависимости от положительной регуляции T3SS в планктонных культурах.В нашем эксперименте с биопленкой и после воздействия более высоких и эффективных концентраций ципрофлоксацина T3SS не повышался. Следовательно, T3SS, по-видимому, не играет роли в толерантности к антибиотикам в биопленке. В соответствии с этими результатами можно предположить, что субингибирующие концентрации антибиотиков могут запускать защитные механизмы, в которые могут быть вовлечены пути вирулентности, такие как T3SS, тогда как предположительно летальные концентрации антибиотиков могут приводить к общей активации реакции на стресс, при которой стратегии голодания, такие как голодание строгий ответ может быть «последней надеждой» на выживание бактерий (Fajardo and Martínez, 2008; Andersson and Hughes, 2014; Harms et al., 2016).

Что касается систем токсин-антитоксин, то их роль в сохранении биопленки P. aeruginosa до сих пор остается невыясненной (Maisonneuve et al., 2018). Недавно Гуо и соавт. (2019) продемонстрировали, что HigA, продуцируемый на более высоком уровне, чем HigB, подавляет экспрессию генов вирулентности, таких как mvfR , которые контролируют синтез пиоцианина. Более того, в присутствии гентамицина или ципрофлоксацина Lon-протеаза активировалась, что приводило к деградации HigA и дерепрессии транскрипции higB .На первых этапах воздействия ципрофлоксацина в нашей модели биопленки генов higA и генов higB сверхэкспрессировались на протяжении всего эксперимента и друг друга на сопоставимом уровне. Этот результат предполагает, что антитоксиновый белок может ингибировать родственный ей токсин и действовать как репрессор транскрипции, контролирующий продукцию факторов вирулентности. Наши результаты отличались от результатов, опубликованных Li et al. (2016) и Guo et al. (2019), поскольку higA активировался в нашей работе, несмотря на сверхэкспрессию lon .Это различие в транскриптомных профилях системы токсин-антитоксин может зависеть от условий эксперимента, сохраненных в исследованиях. Наш транскриптомный анализ был выполнен непосредственно из биопленки после воздействия концентраций ципрофлоксацина, превышающих МИК, тогда как исследования, описанные выше, были выполнены в планктонных культурах после воздействия субингибирующих концентраций антибиотика. Поэтому мы предполагаем, что либо деградация HigA произойдет после более длительного воздействия антибиотиков на биопленку, либо токсин HigB не способствует сохранению биопленки.

Гипотезой этого исследования было изменение профиля экспрессии генов, которое произошло очень рано после воздействия антибиотиков, особенно в случае строгого ответа, и которое могло быть связано с фенотипическим переключением в сторону устойчивости к антибиотикам и снижения клеточной активности. После начала строгого ответа переключение на персистенцию, а затем на покой может быть завершено, и строгий ответ может больше не быть существенным, о чем свидетельствует снижение экспрессии генов строгого ответа после продолжительного воздействия ципрофлоксацина в нашем исследовании.Таким образом, наши данные показали, что общая реакция на стресс, по-видимому, очень быстро запускается после лечения антибиотиками. Насколько нам известно, ни в одном другом исследовании не сообщалось о динамической адаптации P. aeruginosa с течением времени в биопленке в присутствии ципрофлоксацина. Тем не менее для углубления этого вопроса необходимы дальнейшие исследования. Например, может быть очень информативно оценить дефицит мутантов P. aeruginosa в генах spoT , relA и lon при лечении ципрофлоксацином в нашей модели биопленки и в других in vitro и in vivo. моделей биопленок.

Хотя в этом исследовании представлены новые данные о влиянии ципрофлоксацина на устойчивость биопленки к антибиотикам, результаты следует интерпретировать с осторожностью. Во-первых, это исследование было ограничено изучением одного штамма. Более того, имитация биопленочного образа жизни бактерий остается трудной задачей (Lebeaux et al., 2013). Результаты, полученные в моделях биопленки, могут сильно различаться в зависимости от штамма, антибиотика, используемой среды и многих других экспериментальных условий (Macia et al., 2014). Затем метаболизм P. aeruginosa зависит от многочисленных строго регулируемых путей. Таким образом, полный транскриптомный профиль был бы более информативным. К сожалению, как и другие авторы (Jahns et al., 2016), несмотря на неоднократные попытки, нам не удалось выделить достаточное количество РНК для проведения анализа РНКсек.

Таким образом, текущее исследование показало, что ципрофлоксацин может быть ответственен за первичную бактериальную гибель значительной части бактериальной популяции биопленки.Но одновременно с этим ципрофлоксацин может вызвать у части исходной популяции активацию строгого ответа, начинающуюся уже через 1 ч после воздействия антибиотика. Строгий ответ, вероятно, в сочетании с другими невыясненными регуляторными механизмами, по-видимому, способствовал переключению на персистирующий, устойчивый к антибиотикам фенотип выживших клеток. Через 24 часа лечения антибиотиками, несмотря на неожиданное разрушение матрикса биопленки ципрофлоксацином, клетки-персистеры не уничтожались.Даже если это исследование по-прежнему не дает окончательного механистического объяснения устойчивости к антибиотикам, связанной с биопленками, оно может способствовать лучшему пониманию бактериального фенотипического переключения в сторону персистенции во время инфекций, связанных с биопленками.

Заявление о доступности данных

Все наборы данных, созданные для этого исследования, включены в статью/дополнительный материал.

Вклад авторов

AS, ME и SC разработали исследование. AS, VR, EB и MB проводили эксперименты.AS, ME, EB и SC проанализировали данные. AS и ME написали рукопись. FC просмотрел рукопись и рисунки. Все авторы внесли поправки и одобрили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

Это исследование было поддержано внутренним финансированием и проводилось в рамках нашей повседневной работы.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2019.02603/full#supplementary-material

.

Сноски

    Каталожные номера

    Амато С.М., Фазен С.Х., Генри Т.С., Мок В.В.К., Орман М.А., Сандвик Э.Л. и др. (2014). Роль метаболизма в бактериальной персистенции. Фронт. микробиол. 5:70. doi: 10.3389/fmicb.2014.00070

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Андерл, Дж. Н., Франклин, М. Дж., и Стюарт, П. С. (2000). Роль ограничения проникновения антибиотиков в устойчивость биопленки Klebsiella pneumoniae к ампициллину и ципрофлоксацину. Антимикроб. Агенты Чемотер. 44, 1818–1824 гг. doi: 10.1128/aac.44.7.1818-1824.2000

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Бентхолл, Г., Тузель, Р. Э., Хинд, К.K., Titball, R.W., Sutton, J.M., Thomas, R.J., et al. (2015). Оценка эффективности антибиотиков против инфекций, вызванных планктонными или биопленочными культурами Pseudomonas aeruginosa и Klebsiella pneumoniae в Galleria mellonella . Междунар. Дж. Антимикроб. Агенты 46, 538–545. doi: 10.1016/j.ijantimicag.2015.07.014

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Чанд, С., Лусунзи, И., Вил, Д. А., Уильямс, Л.Р. и Карузо П. (1994). Экспресс-скрининг антимикробной активности экстрактов и натуральных продуктов. Дж. Антибиот. 47, 1295–1304. doi: 10.7164/антибиотики.47.1295

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Чиофу, О., и Толкер-Нильсен, Т. (2019). Толерантность и резистентность биопленок Pseudomonas aeruginosa к антимикробным агентам — как P. aeruginosa может избежать антибиотиков. Фронт. микробиол. 10:913. doi: 10.3389/fmicb.2019.00913

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Колвин, К.М., Гордон, В.Д., Мураками, К., Борли, Б.Р., Возняк, Д.Дж., Вонг, Г.С.Л., и соавт. (2011). Полисахарид pel может выполнять структурную и защитную роль в матрице биопленки Pseudomonas aeruginosa . PLoS Патог. 7:e1001264. doi: 10.1371/journal.ppat.1001264

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Костертон, Дж. В., Стюарт П.С. и Гринберг Э.П. (1999). Бактериальные биопленки: частая причина персистирующих инфекций. Наука 284, 1318–1322. doi: 10.1126/наука.284.5418.1318

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Диас, М. Х., и Хаузер, А. Р. (2010). Цитотоксин Pseudomonas aeruginosa exou вводят в фагоцитирующие клетки при острой пневмонии. Заразить. Иммун. 78, 1447–1456. doi: 10.1128/IAI.01134-09

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Диес-Агилар, М., Морозини М.И., Тедим А.П., Родригес И., Акташ З. и Кантон Р. (2015). Противомикробная активность комбинации фосфомицин-тобрамицин в отношении изолятов Pseudomonas aeruginosa оценивалась с помощью анализов время-этоксикация и концентраций для предотвращения мутаций. Антимикроб. Агенты Чемотер. 59, 6039–6045. doi: 10.1128/AAC.0082-15

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Эллиот, Т.С.Дж., Шелтон, А., и Гринвуд, Д. (1987). Реакция Escherichia coli на ципрофлоксацин и норфлоксацин. J. Med. микробиол. 23, 83–88. дои: 10.1099/00222615-23-1-83

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Гивсков, М., Хенцер, М., Эрсбёлль, Б.К., Хейдорн, А., Штернберг, К., Нильсен, А.Т., и соавт. (2000). Количественная оценка структур биопленки с помощью новой компьютерной программы comstat. Микробиология 146, 2395–2407. дои: 10.1099/00221287-146-10-2395

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Го, Ю., Сунь, К., Ли, Ю., Тан, К., Ни, С., и Ван, X. (2019). Антитоксин HigA ингибирует экспрессию гена вирулентности mvfR у Pseudomonas aeruginosa . Окружающая среда. микробиол. 21, 2707–2723. дои: 10.1111/1462-2920.14595

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Guyard-Nicodème, M., Bazire, A., Hémery, G., Meylheuc, T., Mollé, D., Orange, N., et al. (2008). Модификации внешней мембраны Pseudomonas fluorescens MF37 в ответ на гиперосмолярность. Дж. Протеом. Рез. 7, 1218–1225. doi: 10.1021/pr070539x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Høiby, N., Bjarnsholt, T., Moser, C., Bassi, G.L., Coenye, T., Donelli, G., et al. (2015). Руководство ESCMID по диагностике и лечению биопленочных инфекций, 2014 г. Clin. микробиол. Заразить. 21, С1–С25. doi: 10.1016/j.cmi.2014.10.024

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Янс, А.С., Эйлерс, Х., и Алексеев, О.А. (2016). Транскриптомный анализ биопленок Propionibacterium acnes in vitro. Анаэробы 42, 111–118. doi: 10.1016/j.anaerobe.2016.10.001

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Дженнингс Л.К., Сторек К.М., Ледвина Х.Е., Кулон С., Мармон Л.С., Садовская И. и соавт. (2015). Pel представляет собой катионный экзополисахарид, который сшивает внеклеточную ДНК в матрице биопленки Pseudomonas aeruginosa . Проц. Натл. акад. науч. США 112, 11353–11358. doi: 10.1073/pnas.1503058112

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Лебо, Д., Чаухан, А., Рандуэлес, О., и Белуан, К. (2013). От in vitro к in vivo моделям инфекций, связанных с бактериальными биопленками. Патогены 2, 288–356. doi: 10.3390/pathogens2020288

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Лебо, Д., Гиго, Ж.-М., и Белуан, К.(2014). Инфекции, связанные с биопленкой: преодоление разрыва между клиническим ведением и фундаментальными аспектами сопротивления антибиотикам. Микробиолог. Мол. биол. Ред. 78, 510–543. doi: 10.1128/MMBR.00013-14

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Li, M., Long, Y., Liu, Y., Liu, Y., Chen, R., Shi, J., et al. (2016). HigB Pseudomonas aeruginosa усиливает уничтожение фагоцитов за счет активизации системы секреции типа III в персистирующих клетках, индуцированных ципрофлоксацином. Фронт. Заражение клетки. микробиол. 6:125. doi: 10.3389/fcimb.2016.00125

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Лимоли, Д. Х., Джонс, С. Дж., и Возняк, Д. Дж. (2015). Бактериальные внеклеточные полисахариды в формировании и функционировании биопленок. Микробиолог. Спектр. 3. doi: 10.1128/microbiolspec.MB-0011-2014

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Масия, доктор медицинских наук, Рохо-Молинеро, Э., и Оливер, А.(2014). Тестирование чувствительности к противомикробным препаратам бактерий, растущих в биопленках. клин. микробиол. Заразить. 20, 981–990. дои: 10.1111/1469-0691.12651

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Maisonneuve, E., Castro-Camargo, M., and Gerdes, K. (2018). Уведомление об отзыве: (p)ppgpp контролирует персистенцию бактерий путем стохастической индукции токсин-антитоксиновой активности. Сотовый 172:1135. doi: 10.1016/j.cell.2018.02.023

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Масаде, М., Альзуби, К., Ахмед, В., и Магаджи, А. (2019). In vitro сравнение антибактериальной и антибиопленочной активности отдельных фторхинолонов в отношении Pseudomonas aeruginosa и метициллин-резистентного Staphylococcus aureus . Патогены 8:12. doi: 10.3390/pathogens8010012

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Менса, Дж., Барберан, Дж., Сориано, А., Ллинарес, П., Марко, Ф., Кантон, Р., и другие. (2018). Выбор антибиотиков при лечении острых инвазивных инфекций Pseudomonas aeruginosa : рекомендации испанского общества химиотерапии. Ред. Esp. Кимиотер. 31, 78–100.

    Академия Google

    Морадали, М.Ф., Годс, С., и Рем, Б.Х.А. (2017). Pseudomonas aeruginosa Образ жизни: парадигма адаптации, выживания и стойкости. Фронт. Заражение клетки. Микробиол 7:39. doi: 10.3389/fcimb.2017.00039

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Малкахи, Л. Р., Бернс, Дж. Л., Лори, С., и Льюис, К. (2010). Появление штаммов Pseudomonas aeruginosa , продуцирующих высокие уровни клеток-персистеров, у пациентов с муковисцидозом. J. Бактериол. 192, 6191–6199. doi: 10.1128/JB.01651-09

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Nguyen, D., Joshi-Datar, A., Lepine, F., Bauerle, E., Olakanmi, O., Beer, K., et al. (2011). Активные реакции голодания опосредуют толерантность к антибиотикам в биопленках и бактериях с ограниченным содержанием питательных веществ. Наука 334, 982–986. doi: 10.1126/science.1211037

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Отани, С., Hiramatsu, K., Hashinaga, K., Komiya, K., Umeki, K., Kishi, K., et al. (2018). Субминимальные ингибирующие концентрации цефтазидима ингибируют образование биопленки Pseudomonas aeruginosa . Дж. Заражение. Чемотер. 24, 428–433. doi: 10.1016/j.jiac.2018.01.007

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Памп, С.Дж., Гьермансен, М., Йохансен, Х.К., и Толкер-Нильсен, Т. (2008). Толерантность к противомикробному пептиду колистину в биопленках Pseudomonas aeruginosa связана с метаболически активными клетками и зависит от генов pmr и mexAB-oprM. Мол. микробиол. 68, 223–240. doi: 10.1111/j.1365-2958.2008.06152.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Павар В., Комор У., Касниц Н., Белецкий П., Пилс М.С., Гохт Б. и соавт. (2015). In vivo эффективность противомикробных препаратов в отношении продуцирующих биопленку штаммов Pseudomonas aeruginosa . Антимикроб. Агенты Чемотер. 59, 4974–4981. doi: 10.1128/AAC.00194-15

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Питерс, Э., Нелис, Х.Дж., и Коэнье, Т. (2008). Сравнение нескольких методов количественного определения микробных биопленок, выращенных в титрационных микропланшетах. J. Microbiol. Методы 72, 157–165. doi: 10.1016/j.mimet.2007.11.010

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Reffuveille, F., de la Fuente-Núñez, C., Mansour, S., и Hancock, R.E.W. (2014). Антибиопленочный пептид широкого спектра действия усиливает действие антибиотика против бактериальных биопленок. Антимикроб. Агенты Чемотер. 58, 5363–5371. doi: 10.1128/AAC.03163-14

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Споринг, А.Л., и Льюис, К. (2001). Биопленки и планктонные клетки Pseudomonas aeruginosa обладают сходной устойчивостью к уничтожению противомикробными препаратами. J. Бактериол. 183, 6746–6751. doi: 10.1128/JB.183.23.6746-6751.2001

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Стюарт, П. С., Франклин, М. Дж., Уильямсон, К.С., Фолсом, Дж. П., Богли, Л., и Джеймс, Г. А. (2015). Вклад стрессовых реакций в толерантность к антибиотикам в биопленках Pseudomonas aeruginosa . Антимикроб. Агенты Чемотер. 59, 3838–3847. doi: 10.1128/AAC.00433-15

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Видучич Д., Оно Т., Мураками К., Сусиловати Х., Каяма С., Хирота К. и др. (2006). Функциональный анализ генов spoT, relA и dksA на толерантность к хинолонам у Pseudomonas aeruginosa в условиях отсутствия роста. Микробиолог. Иммунол. 50, 349–357. doi: 10.1111/j.1348-0421.2006.tb03793.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Уолтерс М.С., Роу Ф., Бугникур А., Франклин М.Дж. и Стюарт П.С. (2003). Вклад проникновения антибиотиков, ограничения кислорода и низкой метаболической активности в толерантность биопленок Pseudomonas aeruginosa к ципрофлоксацину и тобрамицину. Антимикроб. Агенты Чемотер. 47, 317–323. дои: 10.1128/аак.47.1.317-323.2003

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Вананди С., Брауэр Н., Лю К., Махон А., Корк С., Карузо П. и др. (2005). Оптимизация антибактериального анализа диацетата флуоресцеина. J. Microbiol. Методы 60, 21–30. doi: 10.1016/j.mimet.2004.08.010

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Виганд, И., Хилперт, К., и Хэнкок, Р. Э. В. (2008). Методы разведения в агаре и бульоне для определения минимальной ингибирующей концентрации (МПК) противомикробных веществ. Нац. протокол 3, 163–175. doi: 10.1038/nprot.2007.521

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ясуда Х., Аджики Ю., Кога Т., Кавада Х. и Йокота Т. (1993). Взаимодействие между биопленками, образованными Pseudomonas aeruginosa и кларитромицином. Антимикроб. Агенты Чемотер. 37, 1749–1755. doi: 10.1128/AAC.37.9.1749

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Проблемы матричных организаций

    Ни одна организационная структура или метод управления не являются совершенными.И любая форма может страдать от множества проблем, возникающих из-за самой конструкции. Это особенно верно, когда компания пробует новую форму. В этой статье мы рассмотрим одну относительно новую форму организации — матрицу, — которая приобрела значительную популярность в последние годы, но имеет ряд существенных патологий. Однако, прежде чем обсуждать ее недостатки, давайте остановимся на матричном управлении и организации (см. врезку ниже) и на том, насколько широко эта матрица сегодня распространена в промышленности США.

    Список известных компаний, использующих матрицу в той или иной форме, становится длинным и внушительным. Возьмем, к примеру, компанию General Electric с годовым объемом продаж в 14 миллиардов долларов и штатом около 400 000 человек в десятках различных направлений. На протяжении десятилетий, несмотря на разнообразие направлений деятельности, GE использовала одну базовую структуру во всей своей организации: пять функциональных менеджеров подчинялись одному генеральному директору. Используя логику, согласно которой компания должна организоваться для удовлетворения конкретных потребностей каждого бизнеса, некоторые группы, подразделения и отделы GE, которые сочли пирамидальную форму громоздкой, обратились к матрице как к фундаментальной альтернативе.

    Планируя свою организацию на следующие десять лет, руководство GE заявляет в своем Бюллетене по организационному планированию (сентябрь 1976 г.):

    «Мы выделили матричную организацию. не потому, что это подножка, на которую мы хотим, чтобы вы все запрыгнули, а скорее потому, что это сложная, трудная и иногда разочаровывающая форма организации, с которой приходится жить. Однако это также предвестник грядущих событий. Но при правильной реализации он предлагает многое из лучшего из обоих миров. И всем нам придется научиться использовать организацию, чтобы подготовить менеджеров к тому, чтобы все чаще справляться с высокими уровнями сложности и двусмысленности в ситуациях, когда они должны получать результаты от людей и компонентов , а не , находящихся под их непосредственным контролем…

    «Успешный опыт работы в рамках матрицы представляет собой лучшую подготовку для человека к управлению огромным диверсифицированным учреждением, таким как General Electric, где так много сложных, противоречивых интересов должно быть сбалансировано, чем продукты и функциональные режимы, которые были нашей отличительной чертой в прошлом. двадцать лет.

    Другие крупные корпорации, занимающиеся различными видами деятельности, такие как Bechtel, Citibank, Dow Chemical, Shell Oil, Texas Instruments и TRW, и это лишь некоторые из них, также обратились к матрице. Основываясь на наших исследованиях матрицы в этих компаниях, мы полагаем, что, хотя отчасти популярность матрицы является просто мимолетной прихотью, в большинстве случаев ее использование основано на веских деловых причинах, которые сохранятся. Самое основное преимущество матрицы по сравнению с привычной функциональной или продуктовой структурой заключается в том, что она облегчает быстрое реагирование руководства на меняющиеся рыночные и технические требования.Кроме того, это помогает менеджерам среднего звена принимать компромиссные решения с точки зрения общего управления.

    Однако, поскольку матрица является относительно новой формой, компании, принявшие ее, неизбежно учатся на основе проб и ошибок. Ошибки, а также успехи этих пионеров могут быть очень информативными для компаний, которые следуют их примеру. Здесь мы представляем некоторые из наиболее распространенных проблем, возникающих, когда компания использует матричную форму. Для удобства мы сначала диагностируем каждую патологию, а затем обсуждаем ее профилактику и лечение.Однако, используя этот формат, мы не имеем в виду, что простое оказание первой помощи при патологиях излечит их.

    Болезни матрицы

    Многие из болезней, которые мы обсуждаем, действительно возникают в более традиционных организациях, но матрица кажется несколько более уязвимой для этих конкретных организаций. Поэтому для менеджеров, думающих о принятии матрицы, разумно ознакомиться с диагностикой, профилактикой и лечением девяти конкретных патологий: тенденции к анархии, борьбы за власть, серьезного группового расстройства, коллапса во время экономического кризиса, чрезмерных накладных расходов, падения в сторону снижения. уровни, неконтролируемое наслоение, взгляд пупка и удушение принятия решения.

    Тенденции к анархии

    Бесформенное состояние замешательства, когда люди не узнают «босса», перед которым они чувствуют себя ответственными.

    Диагноз — Многие менеджеры, не имевшие непосредственного знакомства с матричными организациями, склонны испытывать полувыраженные опасения, что матричные организации ведут к анархии. Основаны ли эти опасения на реальных опасностях? На самом деле сегодня значительное количество организаций успешно использует матричную форму, поэтому нам не нужно рассматривать анархию как общую опасность матрицы.Однако существуют определенные условия или серьезные заблуждения, которые могут привести компанию к бесформенному беспорядку, напоминающему анархию.

    Из личного опыта нам известна только одна организация, которая, используя «скрытую» матричную форму, буквально развалилась по швам во время довольно умеренного экономического спада. Следуя стратегии быстрого роста, эта компания использовала свой высокий коэффициент акций для приобретения, а затем полной ассимиляции более мелких компаний в области оборудования для отдыха.В течение примерно шести месяцев компания превратилась из ошеломляющего успеха в драматическую катастрофу. Вся ее производственная, распределительная и финансовая системы вышли из-под контроля, оставив за собой невыполненные заказы, закрытые фабрики, проблемные запасы и огромные долги.

    Конечно, есть много возможных причин, по которым это могло произойти, но одно из вполне разумных объяснений состоит в том, что структура организации не удалась из-за стресса. Что это был за дизайн?

    По сути, организация использовала функциональную структуру.Приобретая каждую маленькую компанию, высшее руководство сначала поощряло уход владельцев и генеральных менеджеров, а затем возлагало три основные функции компании — продажи, производство и инжиниринг — на их коллег в головной организации. В головном отделе маркетинга молодому агрессивному менеджеру по продукту поручали разработать для приобретенной линейки продуктов всеобъемлющий маркетинговый план, который включал составление прогнозов продаж, планов продвижения, планов ценообразования, прогнозируемых доходов и так далее.Как только высшее руководство одобрило план, оно приказало выбранному менеджеру по продукту поторопиться и воплотить свой план в жизнь. Вот тут-то и появилась скрытая матрица.

    Менеджер по продукту обнаружил бы, что ему приходится работать в разных функциональных направлениях, пытаясь координировать графики производства, запасы, денежные потоки и модели распределения без каких-либо явных и формальных соглашений о характере его отношений с функциональными менеджерами. Поскольку он был заперт в своем утвержденном маркетинговом плане, когда продажи отставали от графика, его реакция заключалась в том, чтобы увещевать людей больше стараться, а не сокращать тиражи.

    Но как только одна или две вещи начали рушиться, в системе не хватило резерва, чтобы все остальное не пошло не так. Когда менеджер по продукту потерял контроль, образовался вакуум власти, в который попали функциональные менеджеры, каждый из которых цеплялся за полный контроль. В результате умеренная рецессия вызвала условия, приближающиеся к анархии.

    Предотвращение — Мы считаем, что урок этого опыта громкий и ясный. Организации не должны слишком полагаться на неформальную или скрытую матрицу для координации важнейших задач.Отношения между функциональными менеджерами и менеджерами по продукту должны быть четкими, чтобы у людей было приблизительное согласие относительно того, кто что должен делать в различных обстоятельствах. При правильном использовании матрица не оставляет такие вопросы в неопределенном статусе; это определенная структура, а не организация «свободной формы».

    Полезный «индекс анархии» показывает, сколько людей в организации не признают одного начальника, перед которым они чувствуют ответственность за большую часть своей работы. В исследовании пяти медицинских школ, печально известных своей анархичностью, та, у которой была наиболее явная матричная структура, была также и той, в которой было наименьшее количество «безначальников». 1

    Лечение —Если случится худшее и компания погрузится в анархию, лучшим ответом будет настоящий антикризисный менеджмент. Кризисная реакция на самом деле не является тайной. Генеральный директор должен собрать всех ключевых людей и критически важную информацию в центр. Он или она должны лично принимать все важные решения по круглосуточному графику, пока не закончится кризис. Тогда и только тогда он сможет приступить к работе по перестройке организации, чтобы она могла противостоять любому будущему потрясению, такому как небольшая рецессия.

    Борьба за власть

    Менеджеры борются за власть во многих организациях, но матричный дизайн почти поощряет их к этому.

    Диагностика — Сущность матрицы — двойная команда. Чтобы такая форма выжила, необходим баланс сил, при котором ее локус, кажется, постоянно меняется, и каждая сторона всегда пытается получить преимущество. Недостаточно просто создать баланс, необходимо также иметь постоянные механизмы проверки вкрадывающегося дисбаланса.

    В бизнес-организациях, которые работают с формой баланса сил, существует постоянная тенденция к дисбалансу. Пока каждая группа или измерение в организации пытается максимизировать свое преимущество по отношению к другим, будет вестись непрерывная уравновешивающая борьба за господствующую власть. Борьба за власть в матрице качественно отличается от борьбы в традиционно выстроенной иерархии, поскольку в последней она явно нелегитимна. Однако в матрице борьба за власть неизбежна; границы полномочий и ответственности пересекаются, побуждая людей максимизировать собственную выгоду.

    Предотвращение — Большинству топ-менеджеров будет чрезвычайно трудно предотвратить любую борьбу за власть. Однако равная сила обеих сторон не позволит борьбе достичь разрушительных высот. Дружеское соперничество следует поощрять, а тотальную драку строго наказывать. Менеджеры в матрице должны настаивать на своих преимуществах, но никогда не с намерением устранить тех, с кем они делят власть, и всегда с точки зрения, охватывающей обе позиции.

    Лечение — Лучший способ гарантировать, что борьба за власть не подорвет матрицу, состоит в том, чтобы заставить менеджеров на осях власти осознать, что абсолютное завоевание власти означает ее окончательную потерю. Эти менеджеры должны видеть, что полная победа в одном измерении только кладет конец равновесию, кладет конец двойственности командования и разрушает матрицу. Они должны рассматривать это разделение власти как основополагающий принцип до и во время всей последующей и неизбежной борьбы за власть.

    Руководители Матрицы должны признать, что им нужны достойные противники, партнеры, которые могут сравниться с ними, чтобы направить конфликт в конструктивное русло.Для этого успешного результата необходимы три вещи.

    Во-первых, матричные менеджеры всегда должны придерживаться институциональной точки зрения, рассматривая свою борьбу с более широкой, общей точки зрения. Во-вторых, они должны совместно договориться о смещении других матричных менеджеров, которые из-за слабости или какой-либо другой неспособности безвозвратно теряют свои позиции. И, в-третьих, они заменяют этих слабых менеджеров самыми сильными из имеющихся людей, даже если это означает размещение очень сильных менеджеров в ослабленных частях организации и обращение вспять их властных инициатив.

    Еще одним ключевым элементом в прекращении борьбы за власть до того, как она выйдет из-под контроля и разрушит баланс, является высший уровень, которому подчиняются руководители дуэлей. Из-за этого элемента матрица представляет собой парадокс — система разделения власти, которая зависит от сильного человека, который не разделяет полномочий, делегированных ему (скажем, правлением), в качестве арбитра между его подчиненными, разделяющими власть. .

    Для этого у топ-менеджера есть множество средств: количество времени, которое он проводит с той или иной стороной матрицы, разница в оплате труда, скорость продвижения по службе, прямые приказы, отдаваемые одному измерению, а не другому, и так далее.Однако прежде всего он должен защищать слабое измерение в организации, а не обязательно слабого менеджера, отвечающего за это измерение.

    Тяжелый группит

    Ошибочное мнение, что матричное управление — это то же самое, что и групповое принятие решений.

    Диагноз — Путаница матричного поведения с групповым принятием решений, вероятно, возникает из-за того, что матрица часто развивается из новых проектных или бизнес-команд, которые действительно предполагают групповой процесс принятия решений.Разумеется, во многих случаях для менеджеров вполне разумно принимать решения в группах. Но менеджеры должны ожидать возникновения трудностей, если они считают, что групповое принятие решений является сутью матричного поведения.

    Мы видели одну матричную организацию, у которой был тяжелый случай «групповой болезни». В этой многопрофильной компании по производству электроники был менеджер по продукту и группа по продукту, состоящая из специалистов, набранных из рядов каждого функционального отдела, назначенных для каждого продукта.Все идет нормально. Но каким-то образом идея о том, что матричная структура требует, чтобы все бизнес-решения вырабатывались на групповых собраниях, стала преобладающей в организации. Принимать решения другими способами считалось неправомерным и не в духе матричных операций.

    Многие решения, которые приходилось принимать по каждому продукту, включали подробные вопросы, с которыми регулярно были знакомы только один или два человека. Тем не менее, все члены команды были вынуждены слушать обсуждение этих вопросов до тех пор, пока не было принято решение, и даже ожидалось, что они будут участвовать в обсуждении и влиять на выбор.Некоторым людям, казалось, нравилась постоянная диета, состоящая из совещаний, и возможность попрактиковаться в качестве универсала.

    Однако большее количество людей считало, что их время тратится впустую, и предпочло бы, чтобы решения принимались наиболее информированными людьми. Инженеры, в частности, жаловались, что время, которое они проводят на собраниях, лишает их возможности укрепить свою особую компетентность и идентичность. Отмечая эти личные реакции, старшие менеджеры сообщили об общем разочаровании скоростью и гибкостью организационных ответов.

    Предупреждение — Поскольку сама идея матричной организации до сих пор незнакома многим менеджерам, понятно, что они путают ее с такими процессами, как групповое принятие решений. Ключом к профилактике является образование. Топ-менеджеры должны сопровождать свой стратегический выбор перехода к матрице серьезными просветительскими усилиями, чтобы разъяснить всем участникам, что такое матрица, а что нет.

    Лечение — В случае многопрофильной электронной компании проблема обнаружилась, когда мы исследовали матричный подход.Как только пожилые люди четко диагностировали проблему, она была излечена на 90%. Высшее руководство решительно заявило, что в групповых решениях нет ничего священного и что неразумно постоянно вовлекать в процесс всех членов продуктовой команды. Как только была проведена грань между индивидуальными и групповыми вопросами в зависимости от того, у кого была информация, действительно имеющая отношение к решению, встречи стали реже и меньше, а работа пошла на более экономичной и оперативной основе. Концепция командной работы была поставлена ​​в перспективе: как можно чаще и как можно реже.

    Крах во время экономического кризиса

    Когда бизнес приходит в упадок, матрица становится козлом отпущения за плохое управление и отбрасывается.

    Диагноз —Матричные организации, которые расцветают в периоды быстрого роста и процветания, иногда теряются в периоды экономического спада. Поразмыслив, мы можем понять это. В благополучные времена компании часто расширяют направления своей деятельности и рынки, которые они обслуживают. Вытекающая из этого сложность может повернуть их к матричному управлению и организации.

    Однако, если эти компании следуют нормальному деловому циклу, пройдет от двух до пяти лет, прежде чем они испытают очередной экономический кризис, что более чем достаточно для того, чтобы матричная концепция распространилась по всей компании. К тому времени матрица занимает центральное место в корпоративных разговорах и является знакомой частью этих организаций. Хотя могут быть некоторые проблемы, матрица, похоже, останется.

    Когда начинается нисходящая часть экономического цикла, высшее руководство в этих компаниях может быть заметно обеспокоено конфликтом между подчиненными, а также очевидной медлительностью, с которой они реагируют на ситуацию.«Нам нужны решительные действия» — их боевой клич.

    В авторитарной структуре высшее руководство может действовать быстро, потому что ему не нужно учитывать спектр мнений. Думая, что нет времени на организационные игрушки и мастерство, руководители высшего звена берут на себя командование почти, но не совсем забытым способом, и врезают свои директивы в цепочку. Матрица «готова».

    Предотвращение — Высшее руководство может предотвратить такого рода коллапс матрицы, применяя общее управленческое мастерство, независимое от матрицы, задолго до того, как наступит решающий момент.Например, хорошее планирование часто может предсказать спады в экономическом цикле. Корпоративные структуры, такие как матрица, не должны меняться из-за стандартных изменений в бизнес-цикле. Однако, когда управленческое планирование было плохим, матрица становится легко доступным козлом отпущения.

    Компании, переживающие серьезные экономические кризисы, часто вносят радикальные изменения сразу во многих направлениях: сокращают ассортимент продукции, закрывают офисы, массово сокращают персонал и бюджет, ужесточают управленческий контроль.Матрицу часто делают в этот период по нескольким причинам: это представляет слишком большой риск; «на самом деле это никогда не работало должным образом», и смертельный удар может скрыть провал реализации; и качество принятия решений не улучшило производительность в достаточной степени, чтобы уравновесить трудные времена. Меры, которые руководство может предпринять для предотвращения этой патологии, не лежат в рамках самой матрицы, а связаны с улучшением базовых управленческих навыков и планирования.

    Компания, занимающаяся недвижимостью и строительством, представляет собой пример того, как компания может предвидеть экономический кризис и гибко реагировать на него, что демонстрирует силу, а не слабость матрицы.Компания разработала структуру и процедуры, которые особенно хорошо подходят для экономической неопределенности бизнеса. К ним относятся набор полностью принадлежащих дочерних компаний, каждая из которых эквивалентна функциональному отделу в производственной компании, и каждая является «домашней базой» для различных специалистов, необходимых для выполнения всех этапов крупного строительного проекта. Главы дочерних компаний выступают в качестве главных продавцов своих различных услуг и часто возглавляют группы по торгам, которые составляют сложные предложения.

    По мере продвижения проекта предложения выбранный менеджер проекта привлекается к команде в ожидании заключения контракта. Это обеспечивает упорядоченный переход к этапу управления проектом. На проектный офис возложена основная ответственность за контроль затрат, графиков и качества проекта, но команда высшего руководства материнской компании регулярно проверяет проект в качестве резерва.

    Компания успешно использовала матрицу, чтобы выдержать серьезные изменения как в доступности бизнеса по сегментам рынка, например, от школ до больниц, так и в уровне строительной деятельности.Он поддерживает кадры профессиональных специалистов и менеджеров проектов, которые могут быть заняты во время спада цикла, который он быстро расширяет во время максимума, заключая субподряд на временные услуги.

    Лечение — Это одна из патологий, требующая профилактического лечения; мы не знаем никакого лечения. Когда матрица рушится во время экономического кризиса, очень маловероятно, что ее можно воскресить. В лучшем случае организация вернется к своим маятниковым временам, чередуя централизованное управление кризисного периода с децентрализованными свободами более процветающих времен.Даже если высшее руководство попытается еще раз, скорее всего, оно получит отрицательный ответ от менеджеров более низкого звена. «Говорили, что привержены матрице, но при первых признаках трудных времен все красивые слова о преимуществах матрицы оказались именно такими — красивыми словами». Если условной реакцией компании на трудные времена является сокращение расходов, она не должна в первую очередь пытаться использовать матрицу.

    Чрезмерные накладные расходы

    Страх больших затрат, связанных с матрицей.

    Диагноз — На первый взгляд, матричная организация удваивает расходы на управление из-за двойной цепочки подчинения. Этот вопрос заслуживает вдумчивого рассмотрения.

    Ограниченное количество исследований матричных накладных расходов показывает, что на начальных этапах накладные расходы действительно растут, но по мере созревания матрицы эти дополнительные затраты исчезают и компенсируются повышением производительности. 2 Наш опыт подтверждает это открытие. В крупной компании, производящей электронику, мы подробно наблюдали, как первоначальный рост накладных расходов не только обязательно происходит в матрице, но также и то, как они могут излишне увеличиваться.В этом случае компания решила с самого начала использовать матричную схему при создании нового операционного подразделения на новой производственной площадке.

    Этот уникальный организационный эксперимент имел ряд положительных сторон, но одной из его проблем были накладные расходы. При укомплектовании нового подразделения высшее руководство заполнило каждый функциональный офис и каждое место менеджера по продукту одним штатным сотрудником. Это привело к тому, что в относительно небольшом подразделении были менеджеры высшего уровня, а также штатные функциональные группы и штатные менеджеры по продуктам.Однако в течение нескольких месяцев это высшее тяжелое подразделение было сокращено до более разумного уровня укомплектования персоналом; назначая людей на два или более слотов, руководство контролировало расходы.

    Предупреждение —Проблема подразделения была вызвана предположением высшего руководства о том, что для каждого управленческого поста требуется штатный сотрудник. Вероятность раздутия гораздо меньше, когда организация постепенно превращается из традиционной структуры в матричную, а менеджеры выполняют функции как функциональных, так и продуктовых менеджеров.Хотя этот метод может быть оправдан как стратегия перехода, он также имеет свои опасности. Более безопасный путь — назначить роли менеджеров на одной стороне матрицы (т. е. две функциональные должности или две должности по управлению продуктом).

    В качестве последнего аргумента против страха перед накладными расходами примите во внимание, что ни одна хорошо управляемая организация не приняла бы матричную структуру без долгосрочного ожидания того, что при данном уровне выпуска операционные издержки будут ниже, чем при других организационных формах. .Каким образом можно добиться такой экономии?

    Потенциальная экономия исходит из двух основных источников: меньшего количества плохих решений и меньшего количества неосторожностей. Во-первых, и это наиболее важно, матрица может повысить качество бизнес-решений, поскольку она помогает своевременно предоставлять необходимую информацию и акцентировать внимание на важных решениях. Второй источник, менее перистый, не столь очевиден, но потенциально имеет большее значение. Как это может работать?

    Лечение — Возможно, самым ярким примером потенциала матрицы по сокращению избыточности человеческих ресурсов является то, как ее используют некоторые консалтинговые организации.Эти фирмы обычно создают матрицу функциональных специалистов против менеджеров по работе с клиентами или клиентами. Остальные консультанты сгруппированы со своими коллегами-специалистами, но их можно назначать на проекты под руководством менеджеров по работе с клиентами или менеджеров по работе с клиентами.

    Таким образом, с точки зрения бухгалтерского учета время работы консультантов напрямую оплачивается счетами клиентов, когда они работают на менеджера по работе с клиентами или по привлечению клиентов. В противном случае их время оплачивается из бюджета функционального руководителя.Таким образом, неоплачиваемые затраты фирмы очень заметны — как по отделам, так и по отдельным консультантам. Конечно, некоторое время, отведенное на функциональные отделы, такое как предыстория, исследовательская работа и время между заданиями, ни в коем случае не должно рассматриваться как потраченное впустую. Но руководство может запланировать такое время заранее, чтобы иметь возможность тщательно изучить отклонения от бюджета.

    Как выразился один старший менеджер консалтинговой фирмы: «В матричной организации негде спрятаться.Этот факт предъявляет четкие требования к людям среднего звена и, следовательно, вынуждает их производить. Для долгосрочного блага как вовлеченных людей, так и организации, топ-менеджеры должны не допускать, чтобы такое давление стало слишком сильным. Поскольку вполне возможно получить как слишком сильное, так и слишком слабое давление, ищется творческое напряжение.

    Погружение на более низкие уровни

    Матрица с трудом выживает на высоких уровнях корпорации и имеет соответствующую тенденцию опускаться до уровней групп и подразделений, где она процветает.

    Диагностика — Затопление может произойти по двум причинам. Либо высшее руководство не поняло или не смогло реализовать матричную концепцию так же, как и руководители низшего звена, либо матрица нашла свое надлежащее место. Например, если компания устанавливает матрицу между своими основными функциональными и продуктовыми группами, менеджеры по продуктам никогда не отказываются от своего полного контроля, и матрица не может закрепиться на корпоративном уровне.

    Но, скажем, один или два менеджера считают эту идею полезной в своих подразделениях.Их собственные функциональные специалисты и руководители проектов могут разделить власть, которую они делегируют, и дизайн может сохраниться в подразделениях корпорации. Например, попытка Dow Chemical сохранить баланс продукта/географии на вершине потерпела неудачу, но баланс функции/продукта сохранялся в пределах географических областей в течение нескольких лет.

    Когда утопление происходит из-за непонимания высшим руководством, оно, скорее всего, происходит в сочетании с другими патологиями, особенно борьбой за власть.Например, если многие руководители высшего звена рассматривают возможность принятия матричной идеи, но только один или несколько человек действительно убеждены в ее ценности, возникает опасность: те, кто придерживается философии и метода, которыми они сами не пользовались, столкнутся с противником. тех, кто может показать, что это действительно работает.

    Предупреждение —Если высшее руководство корпорации продумает, какие аспекты компании оно должно сбалансировать и на каком уровне агрегирования, оно может удержать матрицу от проседания.Например, топ-менеджеры должны задать себе вопрос, все ли бизнес-единицы должны быть сбалансированы центральными функциональными отделами. Если ответ отрицательный, то некоторые бизнес-единицы должны работать как продуктовые подразделения с традиционной пирамидой управления, в то время как другие делят функциональные службы в частичной матрице. Однако проседание не всегда плохо, и его следует предотвращать только тогда, когда оно указывает на разрушение соответствующей конструкции.

    Лечение —Чтобы управление матрицей могло работать гладко, она должна находиться в надлежащем месте.Чаще всего, когда матрица тонет, она может просто испытывать здоровую адаптацию, и ее следует рассматривать как оседающую, а не оседающую. Урегулирование, вероятно, происходит на ранних стадиях эволюции матрицы и приводит к управляемым единицам матрицы.

    Вопрос размера очень беспокоит многих менеджеров, которые, по сути, спрашивают: «Это звучит великолепно для компании стоимостью 250 миллионов долларов с несколькими тысячами сотрудников, но будет ли это работать для компании стоимостью 2 или 3 миллиарда долларов с 50 000 сотрудников?» сотрудники? Вся ее компания размером с одно из наших подразделений.Наш опыт показывает, что матричное управление и организация работают лучше, когда в матричные отношения вовлечено не более 500 менеджеров. Но это не исключает компанию стоимостью от 2 до 3 миллиардов долларов. В компании с 5000 человек в матрице, скорее всего, будет только около 50 менеджеров; таким образом, в компании с 50 000 сотрудников только около 500 человек могут быть задействованы в двойных линиях подчинения. С этим номером люди, которым необходимо регулярно координировать свои действия, могут делать это через коммуникационные сети, основанные на личных отношениях.

    Независимо от размера единицы, в которой работает матрица, важно, чтобы руководство тщательно обдумывало, начиная с анализа задачи и заканчивая структурой организации. Затем, если происходит стабилизация, ее следует рассматривать не как патологию, а как самонастройку, которая свидетельствует о способности организации развиваться вместе с ростом.

    Неконтролируемая несушка

    Матрицы, которые лежат внутри матриц, которые лежат внутри матриц, часто являются результатом динамики власти, а не логики дизайна.

    Диагноз —Иногда матрицы не только опускаются, но и каскадно распространяются по организации и проходят через несколько уровней и через несколько подразделений. Этот процесс наслоения может быть, а может и не быть патологическим. На самом деле это может быть рациональное и логичное развитие матрицы, но мы кратко включаем его здесь, потому что иногда он создает больше проблем, чем решает. С точки зрения метафоры, которую мы использовали в этой статье, наслоение является патологией только в том случае, если матрица начинает метастазировать.Когда это происходит, организационные схемы начинают напоминать чертежи сложной электронной машины, отношения становятся излишне сложными, а матричная форма может стать скорее бременем, чем пользы.

    Профилактика и лечение —Лучшим средством от неконтролируемой несушки является тщательный анализ задач и уменьшение борьбы за власть. Мы видели несколько случаев, когда одно измерение матрицы явно уступало другому, поэтому, адаптировав философию «если не можешь победить их, присоединяйся к ним», она создала матрицу в своем собственном измерении.Продуктовое подразделение, например, разработало собственный функциональный опыт, отличный от функциональных подразделений следующего уровня. Лучшей защитой было хорошее нападение, по крайней мере, так казалось.

    В двух других случаях каждое международное подразделение двух крупных компаний создало свою собственную матрицу, добавив бизнес-менеджеров в качестве наложения на свой географический формат, не согласовывая их с менеджерами, которые руководили группами товаров/услуг внутри страны. В каждом случае адекватная концептуализация топ-менеджерами, вероятно, упростила бы организационную структуру и предотвратила бы расслоение, которое произошло из-за силовых маневров.Менеджмент может наилучшим образом справиться с этим нездоровым состоянием, перебалансировав матрицу таким образом, чтобы ни один менеджер в одном измерении не подвергался слишком большим угрозам или слишком сильно подталкивался к цели власти.

    Дизайн матрицы достаточно сложен и без добавления борьбы за власть. Хорошо концептуализированная матрица должна быть менее сложной и более простой в управлении, чем нелогично организованная.

    Взгляд на пупок

    Менеджеры в матрице могут поддаться чрезмерной внутренней озабоченности и потерять связь с рынком.

    Диагноз —Поскольку матрица способствует значительной взаимозависимости людей и задач и требует навыков ведения переговоров со стороны ее членов, матричные менеджеры иногда склонны погружаться во внутренние отношения за счет уделения внимания внешнему миру, в частности клиентам. Когда это происходит, организация тратит больше энергии на урегулирование собственных споров, чем на обслуживание клиентов. Внешний фокус исчезает, потому что краткосрочные требования повседневной трудовой жизни еще не проработаны.

    Пупкозрители вовсе не вялые; скорее, они вовлечены в горячую братскую любовь / ненависть друг к другу. Эта внутренняя озабоченность более распространена на ранних стадиях матрицы, когда усваиваются новые модели поведения, чем в матрицах, которые функционируют уже несколько лет.

    Профилактика — Какие бы другие патологии ни развивались в матрице, внимание к их излечению обязательно усилит внутреннюю сосредоточенность членов; поэтому профилактика других патологий, безусловно, снизит вероятность возникновения этой.Осознание тенденции также поможет. Поскольку аспект продукта в организации обычно больше ориентирован на внешний мир, чем ресурсный аспект, ответственность за предотвращение чрезмерного самоанализа распределяется неравномерно. Люди, занимающиеся измерением продукта, могут помочь другим сохранить перспективу, но сильная ориентация на маркетинг — лучшая профилактика из всех возможных.

    Лечение — Если менеджеры в матрице смотрят в пупок, первым шагом в лечении является информирование этих менеджеров о последствиях.Клиенты жалуются много или, по крайней мере, больше, чем обычно? Руководителям необходимо противостоять внутренним конфликтам, но также осознавать, что конфронтация вторична по отношению к поддержанию эффективных внешних отношений. Взгляд на пупок обычно происходит, когда матрица полностью инициирована, но еще не отлажена. Люди принимают это, но они поглощены выяснением того, как заставить это работать.

    Второй шаг состоит в том, чтобы относиться к внутреннему фокусу как к симптому основной проблемы: как институционализировать матричные отношения, чтобы они стали привычной и удобной рутиной, и чтобы люди могли работать через них, не становясь одержимыми ими.Наконец, всегда нужно помнить, что любая форма организации есть только средство и никогда не должна становиться самоцелью.

    Решение об удушении

    Слишком много демократии, мало действий?

    Может ли перемещение в матрицу привести к удушению процесса принятия решений, к бесконечным задержкам для дебатов, для прояснения со всеми на виду? Будут ли решения, какими бы хорошо продуманными они ни были, приниматься слишком поздно, чтобы быть полезными? Будет ли слишком много людей иметь власть, чтобы смягчить все смелые инициативы или наложить на них прямое вето? Такие условия могут возникнуть в матрице.Мы имеем в виду три ситуации — постоянное очищение, эскалацию конфликта и односторонний стиль, — каждая из которых требует немного разных превентивных действий и лечения.

    Постоянное согласование — В одной известной нам компании различные специалисты по функциональным вопросам, которые подчинялись второму начальнику, менеджеру по продукту, подхватили идею о том, что они должны решать все вопросы со своими собственными функциональными начальниками, прежде чем соглашаться на решения по продукту. Это означало, что каждый вопрос должен был обсуждаться как минимум на двух встречах, если не больше.Во время первой встречи специалисты и менеджер по продукту могли только рассмотреть факты проблемы, которые затем были вынесены на обсуждение, пока на второй встрече специалисты не урегулировали вопрос со своими функциональными начальниками, каждый из которых в ходе этого процесса получил определение. фактическое право вето на решения по продукту.

    Эта невозможная процедура очистки представляла собой, на наш взгляд, ошибку делегирования, а не матрицы. Следует задаться вопросом, почему функциональным специалистам нельзя было доверить действовать на месте в отношении большинства продуктовых решений таким образом, чтобы это согласовывалось с общими руководящими принципами их функциональных отделов? Либо специалисты были плохо подобраны, слишком неопытны и плохо информированы, либо их начальству не хватало действенной степени доверия друг к другу.Тем не менее, эту проблему, а также ее профилактику и лечение необходимо решать напрямую, не делая из матрицы козла отпущения.

    Эскалация конфликта —Еще один возможный источник удушения решений в матричных организациях возникает, когда менеджеры часто или постоянно передают решения вверх по двойной цепочке команд. Видя, что одним из преимуществ традиционной единой цепочки команд является то, что два несогласных коллеги могут обратиться за решением к своему общему начальнику, менеджеры, незнакомые с матрицей, беспокоятся об этой проблеме едва ли не больше, чем о любой другой.Они смотрят на матрицу и понимают, что ближайшим общим начальником может быть генеральный директор, который может быть на пять или шесть уровней выше. Они понимают, что не так уж много проблем можно передать генеральному директору для решения, не создав при этом предельной информационной перегрузки. Итак, думают они, не приведет ли неизбежное разногласие к огромному нагромождению неразрешенных конфликтов?

    Безусловно, такое может случиться при неисправной матрице. Произойдет ли это, зависит прежде всего от глубины понимания необходимого матричного поведения со стороны менеджеров в дуальной структуре.Представим себе следующую картину: менеджер с двумя начальниками получает резко противоречащие друг другу инструкции от своего продуктового и функционального начальников. Когда он безуспешно пытается согласовать свои инструкции, он совершенно правильно просит о встрече со своими двумя боссами, чтобы решить этот вопрос. Три человека встречаются, но обсуждение захлебывается, решение не достигается, и ни один из боссов не уступает.

    Затем два босса обращаются с проблемой к вышестоящим руководителям в каждой из двух командных цепочек.Это критический шаг. Если два начальника правильно понимают матричное поведение, они сначала выяснят, отражает ли спор нерешенный более широкий вопрос политики. Если это не так, они знают, что должны научить своих подчиненных решать проблему самостоятельно, а не решать ее за них. Короче говоря, они не позволят нерешенной проблеме обостриться, а вернут ее на надлежащий уровень для решения и будут настаивать на том, чтобы решение было найдено быстро.

    Часто конфликт не удается разрешить; однако им можно управлять, что и должно быть, если матрица должна работать.Любые другие действия означали бы неспособность руководства понять суть проекта.

    Односторонний стиль —Третья возможная причина удушения решений в матричной системе может возникать из совершенно другого источника — личного стиля. У некоторых менеджеров есть ощущение, что они не управляют по-настоящему, если не в состоянии принимать четкие односторонние решения. Отождествляя лидерство с решительными действиями, они очень разочаровываются, когда им приходится участвовать в тщательно аргументированных дебатах о мудрости того, что они хотят сделать.

    Такой менеджер, вероятно, будет чувствовать разочарование даже в связи с бизнес-проблемой, решение которой жизненно важно для других функций, помимо его собственных, например, в компании, которая испытывает критическое двойное давление со стороны рынка и развития технологий. Матрица, преднамеренно побуждающая к одновременному принятию решений между двумя или более точками зрения, скорее всего, еще больше разочарует такого человека.

    Если менеджеры начинают чувствовать себя кастрированными из-за двустороннего принятия решений, они наверняка будут недовольны матричной организацией.В таких случаях удушение происходит в глазах смотрящего. Такие люди должны работать над своим личным стилем принятия решений или искать работу в нематричной организации.

    Наконец, легитимность

    Мы не рекомендуем каждой компании использовать матричную форму. Но там, где это уместно, оно может стать важной частью эффективного управленческого процесса. Как и любой новый метод, он может привести к серьезным ошибкам, но опыт, который многие компании приобретают с помощью этой организационной формы, теперь может помочь другим понять его преимущества и избежать его ловушек.

    Матрица, кажется, распространилась вопреки самой себе и своим патологиям: необходимое стало желанным. Это сложно и сложно, и для достижения организационной гибкости требуется человеческая гибкость.

    Но верно и обратное; Успех придал форме легитимность, и по мере распространения концепции знакомство с ней, по-видимому, уменьшает сопротивление и трудности, с которыми люди сталкиваются при использовании матрицы. Теперь менеджеры начинают говорить: «В конце концов, это не так уж ново и не отличается от других.«Это знакомство является признаком принятия, а не изменения или модерации дизайна.

    На протяжении поколений менеджеры жили счастливой фикцией пунктирных линий, указывающих на то, что вторая линия подчинения необходима, если не формальная. Результатом всегда был своего рода управленческий ménage à trois, треугольное соглашение, в котором у менеджера были одни законные отношения (линия подчинения) и другие, которые существовали, но не имели равных привилегий (пунктирная линия).

    По мере того, как руководители становятся более уверенными в матричной форме, они вытаскивают из шкафа пунктирные отношения и придают им легитимность.

    Каждый раз, когда другая организация обращается к матрице, у нее появляется все больше и больше разнообразных предшественников, прокладывающих путь. Примеры более широкой применимости показывают, что матрица становится все менее и менее экспериментом и все более и более зрелой формулировкой в ​​организационном дизайне. Чем больше организаций проходят кривую обучения, тем легче подниматься по самой кривой. Точно так же, по мере того как все больше менеджеров приобретают опыт работы в матричных организациях, они обязаны распространять этот опыт, поскольку некоторые из них неизбежно переходят в другие организации.

    Мы верим, что в будущем матричные организации станут почти обычным явлением и что менеджеры будут меньше говорить о трудностях и патологиях матрицы, чем о ее преимуществах и преимуществах.

    1. Из готовящейся статьи M.R. Weisbord, M.P. Чарнс и П. Р. Лоуренс, «Организационные дилеммы академических медицинских центров», Journal of Applied Behavioral Science, Vol. XIV, № 3.

    2. С. Дж. Миддлтон, «Как создать проектную организацию», HBR, март–апрель 1967 г., с.73.

    Версия этой статьи появилась в выпуске Harvard Business Review за май 1978 года.

    Внеклеточный матрикс при сердечной недостаточности: роль ADAMTS5 в ремоделировании протеогликанов

    Задний план: Ремоделирование внеклеточного матрикса (ECM) является отличительной чертой сердечной недостаточности (HF). Наш предыдущий анализ секретома сердечных фибробластов мышей выявил ADAMTS5 (дезинтегрин и металлопротеиназу с тромбоспондиновыми мотивами 5) как одну из наиболее распространенных протеаз.ADAMTS5 расщепляет хондроитинсульфатные протеогликаны, такие как версикан. Вклад ADAMTS5 и его субстрата версикана в HF неизвестен.

    Методы: Ремоделирование Versican оценивали у мышей, лишенных каталитического домена ADAMTS5 (Adamts5 ΔCat ). Протеомика была применена для изучения ремоделирования ВКМ в образцах левого желудочка пациентов с СН, с особым акцентом на эффекты обычных лекарств, используемых для лечения СН.

    Результаты: Версикан и версикин, продукт расщепления версикана, специфичный для ADAMTS, накапливались у пациентов с ишемической СН. Версикин также был повышен в модели сердечной ишемии/реперфузии у свиней и в сердце мыши после инфузии ангиотензина II. У мышей Adamts5 ΔCat инфузия ангиотензина II приводила к усиленному накоплению версикана и нарушению гиалуроновой кислоты, что сопровождалось снижением уровней интегрина β1, филамина А и коннексина 43.Эхокардиографическая оценка мышей Adamts5 ΔCat выявила снижение фракции выброса и нарушение общей продольной деформации при инфузии ангиотензина II. Гипертрофия сердца и отложение коллагена были такими же, как и у контрольных однопометников. В протеомном анализе большей когорты сердечных эксплантатов от пациентов с ишемической СН (n=65) использование β-блокаторов было связано со снижением отложения ВКМ, причем версикан был одним из наиболее выраженных изменений. Последующие эксперименты на сердечных фибробластах подтвердили, что стимуляция β1-адренергических рецепторов увеличивает экспрессию версикана.Несмотря на сходные клинические характеристики, пациенты с СН, получавшие β-блокаторы, имели отчетливый профиль сердечного ВКМ.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.